加酶标：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。5.　终止反应：于各反应孔中加入2M***0.05ml。6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。




使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。8． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀***盒里的各种成份及样品。9． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。10． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，***。实验完成后应立即读取OD值。11． 加入***的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。12． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。




哺乳动物细胞溶质中的SOD呈绿色，并且由两种亚单位构成，一种含有铜，另一种含有锌（Cu/Zn-SOD）。线粒体和***SOD为红紫色并含有锰（Mn-SOD）。E.coli含有Mn-SOD和Fe-SOD。为了测定SOD的活性，研究人员尝试了许多间接的或者直接的方法，其中，NBT的间接法为常用，因为它很方便。但是，NBT法有几个缺点，例如生成的染料水溶性差，而且会和氧化酶的还原型发生反应。虽然cytochrome C法也常被用来做SOD检测，但它和超氧化物反应过于剧烈，不能测定低水平的SOD。




使用研磨棒进行匀浆时:① 取1～100 mg的动物***或人***移入冰浴预冷的Collection Tube 中，用研磨棒快速研磨成糊状。② 加入350 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1后用研磨棒快速研磨成匀浆。③ 加入350 μl的Solution A将研磨棒上的匀浆冲入Collection Tube中，充分振荡混合后，65℃保温5分钟。【从植物材料或植物培养细胞中提取***组DNA】① 按下表称取适量的新鲜植物材料（如选用的是冷冻干燥植物材料，则用量减半），剪成小块放入研钵中，加入液氮，待样品冷冻完全后快速、用力研磨至粉末状。