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主要设备编辑***(1) 包被缓冲液(PH9.60.05M碳酸盐缓冲液):Na2CO3 1.59克NaHCO3 2.93克加蒸馏水至1000ml(2) 洗涤缓冲液(PH7.4PBS):0.15MKH2PO4 0.2克Na2HPO4·12H2O 2.9克N*** 8.0克KCl 0.2克Tween-20 0.05% 0.5ml加蒸馏水至1000ml(3) 稀释液:牛白蛋白(BSA) 0.1克加洗涤缓冲液至100ml或以羊、兔等与洗涤液配成5~10%使用。
A.富含DNA酶的胰脏、、胸腺、淋巴等***。B.富含胶原蛋白的皮肤、肌腱等***。C.富含角质蛋白的***或坚硬的***(如骨骼)等。② 加入650 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1,温和研磨30秒钟。注)使用上述①-注)的实验材料时,请在加入Solution A及RNase A1后,将研钵置于65℃水浴上研磨1分钟。③ 收集650 μl研磨好的***匀浆液移至Collection Tube中。如果匀浆体积不足650 μl,请补充Solution A至650 μl,65℃保温5分钟。
如从培养的植物细胞中提取***组DNA,请离心收集2×103~1×107的培养植物细胞,加入150 μl水充分悬浮细胞后移入研钵中,加入液氮后快速、用力研磨至粉末状。注)样品研磨应充分,否则将会严重影响***组DNA的收率。② 将研钵移至65℃水浴,当样品粉末刚开始融化时,向研钵中加入700 μl的Solution A和1.2 μl的RNase A1,用力碾磨30秒。③ 收集650 μl研磨好的***匀浆移至Collection Tube中。如匀浆体积不足650 μl,请补充Solution A至650 μl。65℃保温15分钟。注)处理富含纤维的根/茎等植物材料或富含淀粉、蛋白质的种子等时,可延长水浴时间至60分钟。