组成编辑完整的ELISA***盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或的固相载体(吸附剂);(2)酶标记的抗原或(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制(定量测定中);(5)结合物及标本的稀释液;(6)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;(7)酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为***,其浓度按加量及比色液的终体积而异,在板式ELISA中一般采用3mol/L。
加酶标:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。5. 终止反应:于各反应孔中加入2M***0.05ml。6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
做好对照正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊、兔或BSA等封闭。实验条件的选择在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚、聚、聚丙酰胺和纤维素等。
将***完全倒入吸收盒内,盖上盒盖并轻轻摇动,摇匀后静置10分钟。与色卡比色,读出被测空间(或家具)内每立方米空气中甲醛的浓度值。用甲醛检测盒做检测时,要把检测液放入一个容器,当空气流经检测液表面,就把甲醛完全吸收。这样就等于把检测液放入复杂的情况中检测,没有任何一个检测盒可以保证在单位时间内流经检测液表面的空气流量。这样其受温度、湿度、气压、检测液表面积和空气流速影响极大,从而造成检测结果错误极大。