双夹心法1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。



器材（1）　聚塑料板（简称酶标板）40孔或96孔，ELISA检测仪，50μl及100μl加样器，塑料滴头，小毛巾，洗涤瓶。（2）　小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。（3）　4℃冰箱，37℃孵育箱。试验原理***盒是固相夹心法酶联吸附实验（ELISA）.已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。

本***盒用于体外定量检测、血浆、***、细胞上清及相关液体样本中兔骨碱性磷酸酶（BALP）的含量。

有效期：6个月

保存条件：2-8℃

实验原理***盒采用双一步夹心法酶联吸附试验（ELISA）。往预先包被兔骨碱性磷酸酶（BALP）捕获的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的***。颜色的深浅和样品中的兔骨碱性磷酸酶（BALP）呈正相关。用在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。