加酶标：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。5.　终止反应：于各反应孔中加入2M***0.05ml。6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。



做好对照正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊、兔或BSA等封闭。实验条件的选择在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:（1）　固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚、聚、聚丙酰胺和纤维素等。



检测及酶结合物的稀释度合适(均为1:30), 方便试验操作者准确地做稀释工作，保证实验结果的重复性。白介素6是一种,已被证实为B细胞分化因子.它是一种形成系统,它的生理特性,如肝细胞急性蛋白合成的诱导和基于和白介素3协同作用的生激等,也备受关注.并且已证实白介素-6与病理学存在稳定的相关关系.例如,报道多种***的生长因子为白介素-6, 瘤细胞能合成白介素-6并表达白介素-6受体。

注意事项1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有***都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存***。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。

5. 避免***和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和温育时避免强光直接照射。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何反应***不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会******盒中反应***的生物活性。

9. 不能使用过期产品。

10. 如果可能传播***，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。