***液相色谱的历史

1903年俄国植***学家茨维特（Tswett）初次提出“色谱法”（Chromatography）和“色谱图”（Chromatogram）的概念。茨维特使用色谱法 chromatography （来自希腊字， chroma 意思是颜色， graphy 意思是记录 - 直译为颜色记录）来描述他的彩色试验。（令人好奇的是, 俄罗斯名字茨维特意思是颜色。）1930年以后，相继出现了纸色谱、离子交换色谱和薄层色谱等液相色谱技术。1952年，英国学者Martin和Synge 基于他们在分配色谱方面的研究工作，提出了关于气－液分配色谱的比较完整的理论和方法，把色谱技术向前推进了一大步，这是气相色谱在此后的十多年间发展十分迅速的原因。1958年，基于Moore和Stein的工作，离子交换色谱的仪器化导致了氨基酸分析仪的出现，这是近代液相色谱的一个重要尝试，但分离效率尚不理想。1960年中后期，气相色谱理论和实践发展，以及机械、光学、电子等技术上的进步，液相色谱又开始活跃。到60年代末期把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱就出现了HPLC。1970年中期以后，微处理机技术用于液相色谱，进一步提高了仪器的自动化水平和分析精度。1990年以后，生物工程和生命科学在国际和国内的迅速发展，为***液相色谱技术提出了更多、更新的分离、纯化、制备的课题，如人类***组计划，蛋白质组学有HPLC作预分离等。

***液相色谱的系统组成

HPLC 系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。此外，还可根据需要配置梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代HPLC 仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC 仪还备有自动馏分收集装置。

***液相空白色谱柱出峰的原因？

【分析原因】1.确定检测波长，如果是末端吸收，排除***的干扰。

2.使用100%***作为流动相，***作为样品进样，如果为基线，则说明色谱柱及系统完好。

3.然后在换流动相为10%***和90%***水，样品为***，如果有上述“中间位置出现较大的色谱峰”，那说明八成问题在***上，或者稀释***的水上。

4.如果上述2、3都有“中间位置出现较大的色谱峰”，检查检测器及进样器。

5.这些还不能解决，请联系工程师

HPLC概述

液相色谱系统由泵及流路系统、进样系统、色谱柱系统以及检测器系统构成，其中进样系统可细分为手动进样与自动进样，两种进样方式均要求进样的准确性与精密度。其中手动进样系统由于人为因素对进样的准确性有很多大的影响，如人员的手动进样熟练程度等，渐渐退出市场。而自动进样系统，由于具有很高的准确度以及精密度，几乎排除人员因素的影响以及具有高通量、自动运行序列等特点而成为HPLC系统的标配。

液相色谱进样系统位于泵后，色谱柱之前的高压区域，如下图所示。流动相混合之后流经进样系统，将样品溶液带入到色谱柱内，完成进样。