***液相色谱基线漂移的解决方法

（1）控制色谱柱和流动相的温度，并在测试前使用热交换器。

（2）采用***液相色谱级溶剂、高纯度盐和添加剂流动相在使用前脱气，用于在线脱气或氦气脱气。

（3）用***或其他强极性溶剂冲洗流动槽必要时可使用1N硝酸（不要使用盐酸）

（4）移除障碍物或更换管子。参照检测器手册替换流单元格窗口。

（5）改变比率或速度。为了避免这一问题，可以定期检查流动相的组成和速度。

（6）用中等强度的溶剂冲洗并改变流动相，用10-20倍体积的新流量冲洗相对于分析柱使用离子对***和缓冲盐时，应注意平衡柱。

（7）检查流动相的组成采用好的化学***和***液相色谱溶剂8改变分析条件。

（8）使用保护柱，如有必要，定期在样品之间或分析期间用强溶剂冲洗柱。

（9）重置基线。使用了一个新的移动相。

（10）将波长调整到很大吸收波长检测波长的重新选择。

高压液相色谱

这是指柱压一般大于20bar（或300psi）的“高压(或***)液相色谱”，通常指所用色谱柱的塔板数大于2000，一般是在2000～20000的范围之间。

当需要从大量的物质中分离纯化不足1％的所需成分时，分离工作将会十分困难，往往在纯化的后面阶段需要使用10μm或更小颗粒的***填料。为获得所需微量组分，可采用如下分离手段：制备型分离→半制备型分离→分析型分离→产物。为提高每次分离获得纯品的数量，制备型高压液相色谱分离通常在超载情况下运行。

高压液相色谱，即目前常用的***液相色谱。色谱柱内填装的是粒度范围较窄的微小颗粒固定相(3～30μm)，为使流动相流出，需采用较高的压力，同时系统的复杂性及成本亦增大，但分辨率可得到较大的提高。而填装较大颗粒的固定相时，如中压液相色谱系统，装柱较容易，柱的通透性较高(只需较低的泵压力)，可采用更大的色谱柱和更经济的仪器，由此分辨率也较低。

***液相色谱法概述

***液相色谱法(HPLC)是上个世纪七十年代迅速发展起来的一项***、快速的分析分离技术，是现代分离测试的重要手段。色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(station phase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。

HPLC的动力系统：泵

泵是HPLC的动力系统。气相色谱的动力，实际上是钢瓶中气体的压力。而液体，它只有通过泵的转动而使之流动。

我们做一个类比：血液类比成流动相，心脏类比成泵。血管类比成各不锈钢管。那么，血液在心脏作为动力系统，流经着身体的各个系统。如果心脏跳得快点，那么血流量加大，那么血压升高。同样，泵流速提高，流动相流量增大，那么色谱系统压力增大；如果血管被压迫半堵了，那么同样的心跳速度，压力也会增大。同样道理，如果色谱系统被污染，那么污染物堵在色谱柱头，或者各连接口等，那么泵同样的流速，就有可能压力变大。***液相色谱主要出问题的就是压力莫名地增大，一般认为是色谱系统被污染而堵，解决的方法就是查看各个部件，或者清洗流路等。