液相色谱仪
根据应用方向可以分为制备、半制备、分析等类型,使用前两种的应用都是为了制备样品,而后一种则是为了分析样品,做定性定量实验。它们在原理上相同,却也有着各自的区别,现在对前两类液相色谱仪进行比较。
都是制备型仪器,制备、半制备液相色谱仪针对的样品量和分离速度不同,半制备分离纯化的样品量少,由于泵的压力和流速会低一些,分离效率会相对低一些。但它在纯化小样和分离微量元素方面有很大用途。制备型仪器可以用在生产中,比如食品原料中农残去处,***生产中去除无效成分或***成分等。半制备型仪器更多用在实验中,它经常和全自动固相萃取仪搭配使用来更大程度纯化样品。由于泵的功率不同,仪器中各个部分的尺寸和材质也略有不同,半制备型仪器中各部分需要承受的压力较小,处理样品量少,所以从色谱柱到管道、阀门等通量都较小,而制备型仪器就要大一些以应对较大量的样品进入。操作方面基本一致,除了尺寸外没有什么其它实质区别。
液相色谱仪分类方法
1、按分离目的可分:实验室液相色谱仪和工业液相色谱仪。
2、按固定相物理状态可分:液液色谱仪和液固色谱仪。
3、按色谱柱形状可分:填充柱液相色谱仪和平板液相色谱仪。
4、按分离原理可分:吸附液相色谱仪、分配液相色谱仪、离子交换液相色谱仪和凝胶液相色谱仪。
注:①吸附色谱:利用固体吸附表面对不同组分物理吸附性能的差异达到分离的色谱。②分配色谱:利用不同的组分在两相中有不同的分配系数以达到分离的色谱。③离子交换色谱:利用离子交换原理的达到分离的色谱。
液相色谱理论
发展简况液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相,称为经典液相色谱法,此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。***液相色谱法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀,小颗粒具有高柱效,但会引起高阻力,需用高压输送流动相,故又称高压液相色谱法(High Pressure Liquid Chromatography,HPLC)。又因分析速度快而称为高速液相色谱法(High Speed Liquid Chromatography,HSLP)。也称现代液相色谱。
液相色谱和气相色谱相比较,在以下几个方面具有优越性
(1)气相色谱不适用于不挥发物质和对热不稳定物质,而液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的限制。有些样品因为难以汽化而不能通过柱子,热不稳定的物质受热会发生分解,也不适用于气相色谱法。这使气相色谱法的使用范围受到了限制。据统计,目前气相色谱法所能分析的有机物,只占全部有机物的15%~20%。另一方面,液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的限制。所以液相色谱非常适合于分离生物、***有关的大分子和离子型化合物,不稳定的天然产物,种类繁多的其它高分子及不稳定的化合物。
(2)对于很难分离的样品,用液相色谱常比用气相色谱容易完成分离
(3)和气相色谱相比,液相色谱对样品的回收比较容易,而且是定量的,样品的各个组分很容易被分离出来。因此,在很多场合,液相色谱不仅作为一种分析方法,而且可以作为一种分离手段,用以提纯和制备具有中等纯度的单一物质。在气相色谱中所分离出的各样品组分虽也可以回收,但一般都不太方便,而且定量性差。液相色谱法由于具有这些气相色谱法不具备的优点,因此在许多领域得到广泛的应用。
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