什么是液相色谱?
液相色谱(liquid chromatography,LC)是一种色谱技术,用于分离和分析溶液中混合物的化学成分,以确定是否存在或不存在特定成分,如果存在,则存在多少。我们中的许多人会从上学开始就熟悉平面LC的形式,在滤纸上打上黑色墨水标记,将一端浸入水中,然后观察墨水中的成分颜色是否分开。但是,分析应用中使用的大多数LC均基于柱色谱法,这将是本文的***。顾名思义,液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是使用高色谱分辨率进行分离的高的性能分析。分离的组分也可以在检测后使用馏分收集器分离,作为纯化的手段。HPLC有多种不同的配置,可用于分离分子量从半挥发性小分子到几万千道尔顿的大蛋白生物分子的溶解组分。液相色谱法是一种非常流行的分析技术,广泛用于环境监控,农业领域。
制备液相色谱的特点
1、制备液相色谱采用了自动进样器与全封闭样品瓶,极大地解放了人力;
2、使用高精度HPLC制备色谱泵,重现性良好;
3、使用了仪器标配E***检测器,可用于无紫外吸收样品检测;
4、使用高压梯度混合,不需要脱气机,梯度基本无滞后;
5、可使用5u或10u的制备色谱柱,分离效能可与分析柱等同;
6、制备色谱采用灯-钨灯组合光源,光谱范围覆盖190nm-900nm;
7、带有单色仪自校正功能,波长准确性可达0.2 nm;
8、带有光源自检功能,管理光源寿命,提醒及时更换;
9、可使用各种光程的外置式流通池,更换极为方便;
10、仪器支持FLASH色谱组件与中压色谱组件,使用成本更低;
11、检测器同时检测4个波长的色谱峰,并可以同图显示 并指导收集;
12、采用1200线高分辨光栅,在紫外-可见范围具有良好的分光效能。
液相色谱仪在食品检测中的应用
实际的食品安全检测中,液相色谱仪更加适应对沸点高、热稳定性较差、分子量较高物体的测试。
1、N-亚的测定
在腊肉等腌制食品中,生产主体经常会添加或者亚作为腌制食品的发色剂,本身并不存在严重的危害,但是如果其添加的量过大,在还原作用的影响下肉制品中会生成N-亚,而N-亚对***的危害较大,长期摄入会导致和结等***。针对N-亚的传统测量方法是气相色谱法,这种方法只能对被测物体中挥发性的N-亚进行测量,测量的精度不高,而且测量过程中仅色谱测定这一环节就需要一个多小时的时间,而采用液相色谱仪全过程只需要13分钟。
2、多环烃和杂环芳烃的测定
油炸、烧烤肉制品的制作过程中常常会产生多环烃和杂环芳烃等污染物,这种污染物中包含的3,4-苯并芘、二苯并芘是典型的致***物,使用传统的氧化铝层析柱对其含量进行测量起码需要10个小时的时间,而使用液相色谱仪整个测量过程只需要数十分钟。
3、芳香胺的测定
芳香胺是人工合成色素的主要原料,长时间大量摄入会导致对***的代谢系统的强烈,容易诱发等***,由于芳香胺的添加本身是不合法的,所以对芳香胺的检测工作比较重要。通常情况下液相色谱仪测定工作会在5分钟内完成,而传统的TLC测定法则需要50分钟的时间才能完成。
液相色谱理论
发展简况液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相,称为经典液相色谱法,此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。***液相色谱法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀,小颗粒具有高柱效,但会引起高阻力,需用高压输送流动相,故又称高压液相色谱法(High Pressure Liquid Chromatography,HPLC)。又因分析速度快而称为高速液相色谱法(High Speed Liquid Chromatography,HSLP)。也称现代液相色谱。
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