制备液相知多少
色谱分析的目的
分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量;制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。为了加快分离的时间与提高分离的效率,制备色谱的的进样品量很大,导致制备色谱柱子的分离负荷的相应加大,也就必须加大色谱柱填料,增大制备色谱的直径和长度,使用的相对多的流动相。然而,当色谱柱上样品负载加大的时候,往往导致柱效急剧下降而得不到纯的产品。制备色谱,要解决容量与柱子效果之间的矛盾,对重现性也要考虑。从经济上来说。制备色谱要争取少用填料,少用溶剂,要尽可能多的得到产品。
液相色谱基本功能为
1、六种定量计算方法:***法、修正***法、带比例因子的修正***法、内标法、外标法及指数计算法.
2、校准运行:能够实现使用多种不同浓度的标准试样进行校准,建立样品浓度──面积校正曲线.
3、灵活的峰识别和处理能力:可以通过设置峰处理参数和时间程序识别色谱峰的处理,也可以用人工方式进行处理.
4、色谱图形、设定的定量计算方式、峰处理参数及峰鉴定表等可以保存到用户自命名的文件中.
液相色谱特点
①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。
②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
③高:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
④高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。
⑤应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。
⑥柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物
⑦样品量少、容易回收:样品经过色谱柱后不被***,可以收集单一组分或做制备。此外液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被***、易回收等优点,但也有缺点,与气相色谱相比各有所长,相互补充。液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间,除了柱子以外的任何死空间(进样器、柱接头、连接管和检测池等)中,如果流动相的流型有变化,被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽,柱效率降低。液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。
半制备液相色谱层析系统如何进样品
1、将进样器扭到load朝上,吸取一定量待分离液,快速注入,做过的是吸取0.2毫升;
2、点击控制界面菜单栏中“运行控制”按钮样品信息设置信息存储路径(每次都要做);
3、扭动进样器,使处于inload状态,保留时间开始计时;
4、接峰;
5、所有峰出来后,点击菜单栏中的中断中断,准备重复进样。
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