液相色谱操作要求
1、液相开机前先检查洗针液、柱塞清洗液是否足够; 2、液相开机后,首先确保柱塞清洗运行,再执行其它操作。 3、开机排气时,有“purge”阀的仪器应先打开“purge”阀再开泵以5ml/min的流速排气,关“purge”阀的时候先把流速降到 1ml/min再关,切不可吧顺序弄反,否则系统压力会瞬间变高。 4、使用自动进样器时,建议启用“洗针进样”方式,以降低样品残留,对于有些强残留的物质可以选择降低浓度或减小进样量。 5、液相色谱系统压力高时考虑色谱柱堵了,如果将液相色谱换成两通压力依旧高,应该考虑系统管路某部分堵了。管路堵的情况下可以使用热水清洗。对堵塞的通道可以用热水清洗。
制备液相色谱的特点
1、制备液相色谱采用了自动进样器与全封闭样品瓶,极大地解放了人力;
2、使用高精度HPLC制备色谱泵,重现性良好;
3、使用了仪器标配E***检测器,可用于无紫外吸收样品检测;
4、使用高压梯度混合,不需要脱气机,梯度基本无滞后;
5、可使用5u或10u的制备色谱柱,分离效能可与分析柱等同;
6、制备色谱采用灯-钨灯组合光源,光谱范围覆盖190nm-900nm;
7、带有单色仪自校正功能,波长准确性可达0.2 nm;
8、带有光源自检功能,管理光源寿命,提醒及时更换;
9、可使用各种光程的外置式流通池,更换极为方便;
10、仪器支持FLASH色谱组件与中压色谱组件,使用成本更低;
11、检测器同时检测4个波长的色谱峰,并可以同图显示 并指导收集;
12、采用1200线高分辨光栅,在紫外-可见范围具有良好的分光效能。
液相色谱仪分类方法
1、按分离目的可分:实验室液相色谱仪和工业液相色谱仪。
2、按固定相物理状态可分:液液色谱仪和液固色谱仪。
3、按色谱柱形状可分:填充柱液相色谱仪和平板液相色谱仪。
4、按分离原理可分:吸附液相色谱仪、分配液相色谱仪、离子交换液相色谱仪和凝胶液相色谱仪。
注:①吸附色谱:利用固体吸附表面对不同组分物理吸附性能的差异达到分离的色谱。②分配色谱:利用不同的组分在两相中有不同的分配系数以达到分离的色谱。③离子交换色谱:利用离子交换原理的达到分离的色谱。
色谱法分类
按两相的物理状态可分为:气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)。气相色谱法适用于分离挥发性化合物。GC根据固定相不同又可分为气固色谱法(GSC)和气液色谱法(GLC),其中以GLC应用很广。液相色谱法适用于分离低挥发性或非挥发性、热稳定性差的物质。LC同样可分为液固色谱法(LSC)和液液色谱法(LLC)。此外还有超临界流体色谱法(SFC),它以超临界流体(界于气体和液体之间的一种物相)为流动相(常用CO2),因其扩散系数大,能很快达到平衡,故分析时间短,特别适用于手性化合物的拆分。
按原理分为吸附色谱法(AC)、分配色谱法(DC)、离子交换色谱法(IEC)、排阻色谱法(EC,又称分子筛、凝胶过滤(GFC)、凝胶渗透色谱法(GPC)和亲和色谱法。(此外还有电泳。)
按操作形式可分为纸色谱法(PC)、薄层色谱法(TLC)、柱色谱法。
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