同一种填料的分析柱、制备柱按线形放大公式套,分离度会不会变化?
一般会有一定的变化,原因有以下几点:
(1)制备柱的装填是否均匀,如不均匀则可能产生涡流扩散使各个组分的经过通道的直径不同、阻力不一样,停留时间不同,色谱峰可能变宽。
(2)如果样品在流动相中溶解度小,在制备色谱上会有不同的峰展宽。
(3)如果样品在分析柱上有展宽或拖尾的现象,放大到制备柱上后峰的展宽和拖尾经常会非常严重,导致分离失败。
制备色谱柱如何测柱效?
可以选择几种物质,苯,萘、蒽等的衍生物上柱,流动相一般用65-80%的***/水,测定后根据保留时间计算塔板数。由于制备色谱的管路死体积一般比较大,很难得到和供应商相同的柱效。建议在制备柱开始使用时在自己的色谱上测一下柱效,然后定期检测柱效进行以进行比较。
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工业制备色谱
用于制备和生产的大规模生物分离技术所面临的问题是:如何在不***目标蛋白质的生物活性的前提下(温和的条件),以很高的识别性,以及较高的分离能力和收率,经济有效地从稀溶液中提取、分离、纯化目标产物。吸附通常可以在常温、水相、适当的pH、离子强度、避免使用等***的化学***等温和的条件下操作,液相色谱具有很高的分离性能,适合于生物分离过程的要求。
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