***液相色谱法概述

***液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的分离分析技术，是现代分离测定的重要手段。问世以来，因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生***学及临床分析。

在现代***液相色谱分析中，色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。

***液相色谱仪

***液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。

1.进样系统

一般采用隔膜***进样器或高压进样间完成进样操作进样量是恒定的。

2.输液系统

该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。

3.分离系统

该系统包括：色谱柱、连接管和恒温器等。

4.检测系统

***液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种

5.数据处理系统

该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作，使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。

液相色谱柱的保存

1.反向色谱柱实验后的***：

使用缓冲液或含盐的流动相，实验完后应用10%的***/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用***冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的***，防止将填料冲塌陷。

2.长期保存色谱柱：

如，色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下，对于反相柱可以储存于纯***或***中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水中，并将堵头堵上，储存温度尽量是室温。