工业制备色谱价格服务周到「多图」
作者:创新通恒2022/5/31 2:12:27
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视频作者:北京创新通恒科技有限公司







样品如果溶解度太低如何上制备HPLC?

(1)了解一下样品的性质,根据其酸碱性,极性等性质,通过调节溶剂的pH值等,以达到较好的溶解度。

(2)样品可能某种晶型难溶,这样可以加入其他溶剂以助溶。

(3)不是一定要用流动相来溶解样品,对溶解度差的样品,可以选择***,THF或DMSO等溶解样品。特别是DMSO,对一般的化合物溶解度都很好。并且在反相柱上不保留,不会造成干扰。而且DMSO的洗脱能力很弱,一般不会影响峰型。

(4)可以固体上样。





反相色谱分离纯化后,怎样除去流动相产品中的TFA和***或其他杂质?

TFA是反相色谱分离中常用的添加剂。可以用冻干的办法去除,国外许多文献是这样报道的。还可以试试离子交换、凝胶层析、甚至透析和超滤,其中,离子交换层析效果比较好,还可以起到浓缩样品的作用。

首先,冻干的办法应该可以几乎完全地除去TFA和***,***实验前尽量先检测一下冻干品中的残留量,只要不超过允许范围,这种办法是很简单、有效的。

其次,如果你的***的分装量不大的话(<100ug),建议你用离子交换层析,尽量装一个小一点儿的柱子,让含盐洗脱峰的蛋白浓度达10mg/mL以上,稀释后完全符合试验要求。如果用分子筛,考虑稀释,尽量也先过一个离子交换。此外可以试试疏水层析。如果产品是碱的话,可能会形成TFA盐,这样通过上述方法就无法除去。一般可以用碱水洗,然后将产品萃取出来。或者在里面加入一定量的盐酸,再干燥后形成盐酸盐。




色谱材料的不同

色谱材料的可选择性十分的广泛,因为需求的不同,标准化的色谱填料产品往往达不到所需的要求,因此根据需求进行定制化产品成为了一种常见的选择

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纸层析

纸层析,又称纸色谱,以一种特殊设计的滤纸作为固定相。滤纸中的纤维素层含有的水分作为固定相。缓冲液和其他溶剂用作流动相。分离的原理是相似相溶。纸色谱法可以分析的样品非常广。用毛细管或微量吸管将流动相中溶解的样品标记在滤纸上,然后将滤纸放入容器中,使其浸入溶剂中,于阴暗处进行层析,样品将在滤纸表面分离,然后对其形成的颜色进行识别。纸色谱可以分析碳水化合物、蛋白质、氨基酸、***、糖苷、血液和尿液等样品中的代谢物。





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