多肽的分离制备,如何上量？如何增大分离度?

反相HPLC应当是很好的分离小肽方法，用CH3CN或CH3OH：H2O（95：5）做流动相，看保留如何，若无保留，建议改用其他色谱方法进行分离。

关于多肽的分离，首先要知道它的分子量大小，然后选择不同类型的填料，如孔径的大小。我们先在分析柱（4.6mm内径）上做一下实验,找到很大的分离度,这一过程的难度是很大的,要不断地改变流动相和固定相,然后再线性或非线性放大到制备,放大的倍数按分析柱的实验结果。分离后可以通过冷冻干燥得到固体。

还可以考虑离子交换来分l离。

反相色谱分离后，如何快速从流动相中得到产品？

可以考虑先在低温下，减压旋蒸除去其中的有机的溶剂，然后用萃取的方法把产品萃取出来，然后再低温再旋蒸，这样，就可以不将温度升得很高而得到产品。如果要直接蒸掉流动相，水泵的真空度要注意（要检查气密性），否则蒸水会很慢。一般比较好的泵在60～70度即可蒸掉水，如果泵的真空度不好，可能需要80～90度才行，这样容易暴沸导致样品损失。温度太高可能引起物质变性。

　制备色谱仪分类有多种　　

1、按流动相物理状态可分：制备型气相色谱仪、制备型液相色谱仪和制备型超临界流体色谱仪。　　

2、按分离模型可分：制备型线***谱仪和制备型非线***谱仪。　　

3、按分离对象的属性可分：制备型有机色谱仪和制备型无机色谱仪。　　

4、按固定相物理状态可分：制备型气液色谱仪、制备型气固色谱仪、制备型液液色谱仪和制备型液固色谱仪。　　

5、按用途可分：制备型生物色谱仪、制备型制药色谱仪、制备型化工色谱仪、制备型食品色谱仪、制备型菌体色谱仪等。

制备色谱纯化中流速该如何设定

在制备纯化工艺中，想要准确、合理的确定流动相的流速范围，需要结合一定的理论基础和实际的纯化经验。为了使很多新接触制备纯化的用户能够更快、更好的对流速设定，三泰科技的Flash产品都向客户提供佳的流速范围，尤其是SepaBean? machine快速液相制备色谱系统可智能推荐的流速参数，更快更便捷的处理常规的样品分离。但是对于非常规、比较难分离的样品就必须根据分离情况进行适当的流速调整才能成功达到分离要求。今天我们就从原理和纯化经验上探讨如何找到合适的流速，更好的分离那些让人的样品。