***液相色谱基线漂移的解决方法
(1)控制色谱柱和流动相的温度,并在测试前使用热交换器。
(2)采用***液相色谱级溶剂、高纯度盐和添加剂流动相在使用前脱气,用于在线脱气或氦气脱气。
(3)用***或其他强极性溶剂冲洗流动槽必要时可使用1N硝酸(不要使用盐酸)
(4)移除障碍物或更换管子。参照检测器手册替换流单元格窗口。
(5)改变比率或速度。为了避免这一问题,可以定期检查流动相的组成和速度。
(6)用中等强度的溶剂冲洗并改变流动相,用10-20倍体积的新流量冲洗相对于分析柱使用离子对***和缓冲盐时,应注意平衡柱。
(7)检查流动相的组成采用好的化学***和***液相色谱溶剂8改变分析条件。
(8)使用保护柱,如有必要,定期在样品之间或分析期间用强溶剂冲洗柱。
(9)重置基线。使用了一个新的移动相。
(10)将波长调整到很大吸收波长检测波长的重新选择。
关于色谱柱的使用和维护
色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。
调节流速太快。。。
避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓(如前所述)。
反冲色谱柱。。。
一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
预柱和保护柱。。。
选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被***。有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。
液相色谱柱的再生
因为,色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说是柱效的下降。
1.反向柱的再生:
2.正相柱的再生:
3.离子交换柱的再生:
长时间在缓冲溶液中使用和进样,将导致色谱柱离子交换能力下降。用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生,反之,用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。
特别说明:
再生过程必须随时关注柱压变化,柱压过高易导致硅胶变形与开裂及键合相极性端连接顺序紊乱,同时要保证再生时间足够。再生时尽量选择不具备在线脱气的***泵送系统色谱仪器进行
***液相色谱-仪器使用中应注意的几个问题
1、测量值S较佳的位置(即能量很强)调节:用手按住测量值键,逆时针方向调节至所需要的工作波长,记下显示的数值大小。然后再顺时针方向调至所需要的一个工作波长,记下显示的数值大小。记住显示数值大的那个调节方向,在今后工作中改变波长即可选用此种方式,这样能量较强,波长较准。这是因为传动机构机械加工组装差别引起不一致性,所以需要找出方向。
2、紫外检测器不要频繁的开机、关机。
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