***液相色谱的系统组成
HPLC 系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。此外,还可根据需要配置梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等,现代HPLC 仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC 仪还备有自动馏分收集装置。
高压液相色谱
这是指柱压一般大于20bar(或300psi)的“高压(或***)液相色谱”,通常指所用色谱柱的塔板数大于2000,一般是在2000~20000的范围之间。
当需要从大量的物质中分离纯化不足1%的所需成分时,分离工作将会十分困难,往往在纯化的后面阶段需要使用10μm或更小颗粒的***填料。为获得所需微量组分,可采用如下分离手段:制备型分离→半制备型分离→分析型分离→产物。为提高每次分离获得纯品的数量,制备型高压液相色谱分离通常在超载情况下运行。
高压液相色谱,即目前常用的***液相色谱。色谱柱内填装的是粒度范围较窄的微小颗粒固定相(3~30μm),为使流动相流出,需采用较高的压力,同时系统的复杂性及成本亦增大,但分辨率可得到较大的提高。而填装较大颗粒的固定相时,如中压液相色谱系统,装柱较容易,柱的通透性较高(只需较低的泵压力),可采用更大的色谱柱和更经济的仪器,由此分辨率也较低。
液相色谱无压力也无液体流过和解
液相色谱系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,液相色谱在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,液相色谱通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来***液相色谱系统主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统,下面将分别叙述其各自的组成与特点。液相色谱无压力也无液体流过和解液相色谱是利用混合物各组分在固定相和流动相中溶解、分配或吸附等化学作用性能的差异,使各组分在作相对运动的两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离。***液相色谱仪在食品分析、环境分析、生命科学、***检验和无机分析等领域得到广泛使用。一般来说,80%~85% 的有机物原则上可采用***液相色谱仪分析。
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