UPLC和HPLC的区别

与传统的***液相色谱(HPLC)相比，UPLC具有高分离度(ultra resolution)、高速度(ultra speed)、高灵敏度(sensitivity)等优势。在全方面提升HPLC的速度、灵敏度和分离度诸品质的同时，保留其原有的实用性及原理。

其显著的优势是可以缩短分析时间，提高工作效率。

使用UPLC确实能明显缩短分析时间，提高了效率（如某有关物质分析方法，使用HPLC运行一针是75分钟，UPLC完全可以在10分钟内搞定），分析效率提高将近7.5倍。

当然了，分析效率提高这么多，其配套设备肯定也不是闹着玩的。UPLC需要小颗粒杂化填料（1.7um）的色谱柱、更高耐压（达15000Psi）、低系统体积的输液单元。

购买的HPLC柱验收测试时柱压过高，请问为什么？

柱压过高是HPLC柱用户很常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因：

①拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；

②把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查；

③将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，（此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动池）。这时，如果柱压仍不下降，再检查；只用于使用过的柱子。

④更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高，请与厂商联系。一般情况下，在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题。

高压液相色谱

这是指柱压一般大于20bar（或300psi）的“高压(或***)液相色谱”，通常指所用色谱柱的塔板数大于2000，一般是在2000～20000的范围之间。

当需要从大量的物质中分离纯化不足1％的所需成分时，分离工作将会十分困难，往往在纯化的后面阶段需要使用10μm或更小颗粒的***填料。为获得所需微量组分，可采用如下分离手段：制备型分离→半制备型分离→分析型分离→产物。为提高每次分离获得纯品的数量，制备型高压液相色谱分离通常在超载情况下运行。

高压液相色谱，即目前常用的***液相色谱。色谱柱内填装的是粒度范围较窄的微小颗粒固定相(3～30μm)，为使流动相流出，需采用较高的压力，同时系统的复杂性及成本亦增大，但分辨率可得到较大的提高。而填装较大颗粒的固定相时，如中压液相色谱系统，装柱较容易，柱的通透性较高(只需较低的泵压力)，可采用更大的色谱柱和更经济的仪器，由此分辨率也较低。