制备型液相色谱分类
制备型加压液相色谱,按照色谱柱和样品量的大小,分为:
(1)低压液相色谱;
(2)中压液相色谱;
(3)高压液相色谱;
(4)快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠,没有统一、明确的标准。
本设备适用于快速制备复杂的混合物并获得高纯度、高回收率的产物。
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液相色谱的应用
(1)分离混合物液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。通过与试样预处理技术相配合,液相色谱法所达到的高分辨率和高灵敏度,可分离并同时测定性质上十分相近的物质,能够分离复杂混合物中的微量成分。并且随着固定相的发展,还可在充分保持生化物质活性的条件下完成对其的分离。
(2)生化分析由于液相色谱法具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生***学、食品分析、药的研究、环境分析、无机分析等各种领域,并已成为解决生化分析问题有前途的方法。
(3)仪器联用液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。液相色谱一质谱联用技术受到普遍重视,如分析氨基甲酸酯多核芳烃等:液相色谱一红外光谱联用也发展很快,如在环境污染分析测定水中的烃类等.使环境污染分析得到新的发展。
液相色谱仪分类
液相色谱仪依据样品在固定相和流动相分离过程的物理化学原理,可分为以下五种。
1、吸附色谱:
用固体吸附剂作固定相,以不同极性溶剂作流动相,依据样品中各组分在吸附剂上吸附性能的差别来实现分离。
2、分配色谱:
用载带在固相基体上的固定液作固定相,以不同极性溶质作流动相,依据样品中各组分在固定液上分配性能的差别来实现分离。根据固定相和液体流动相相对极性的差别,又可分为正相分配色谱和反相分配色谱。当固定相的极性大于流动相的极性时,可称为正相分配色谱或简称正相色谱;若固定相的极性小于流动相的极性时,可称为反相分配色谱或简称反相色谱。
3、离子色谱:
用微粒离子交换剂作固定相,以具有一定pH值的缓冲溶液作流动相,依据离子型化合物中各离子组分与离子交换剂上表面带电荷基团进行可逆性离子交换能力的差别而实现分离。
4、体积排阻色谱:
用化学惰性的多孔性凝胶作固定相,按固定相对样品中各组分分子体积排阻滞作用的差别来实现分离。以水溶液作流动相的体积排阻色谱柱,称为凝胶过滤色谱;以有作流动相的体积排阻色谱法,称为凝胶渗透色谱法。
5、亲和色谱:
以在不同基体上,键合多种不同特性的配位体作固定相,用具有不同pH值的缓冲溶液作流动相,依据生物分子与基体上键联的配位体之间存在特异性亲和作用能力的差别,而实现对具有生物活性的生物分子的分离。
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