制备液相色谱的作用

由于液相色谱仪的溶质分子在流动相、静态流动相和固定相中的传质过程而导致的峰展宽。溶质分子在流动相和固定相中的扩散、分配、转移的过程并不是瞬间达到平衡,实际传质速度是有限的,这一时间上的滞后使色谱柱总是在非平衡状态下工作,从而产生峰展宽.液相色谱仪的灵敏度高,分析速度快,操作方便等优点,但是受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。而液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。

使用外力使含有样品的流动相通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面.当流动相中携带的混合物流经固定相时,混合物中的各组分与固定相发生相互作用。 由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着液相色谱仪中流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定相保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合,实现混合物中各组分的分离与检测。

　制备液相色谱的特点

      1、制备液相色谱采用了自动进样器与全封闭样品瓶,极大地解放了人力;

　　2、使用高精度HPLC制备色谱泵,重现性良好;

　　3、使用了仪器标配E***检测器,可用于无紫外吸收样品检测;

　　4、使用高压梯度混合,不需要脱气机,梯度基本无滞后;

　　5、可使用5u或10u的制备色谱柱,分离效能可与分析柱等同;

　　6、制备色谱采用灯-钨灯组合光源,光谱范围覆盖190nm-900nm;

　　7、带有单色仪自校正功能,波长准确性可达0.2 nm;

　　8、带有光源自检功能,管理光源寿命,提醒及时更换;

　　9、可使用各种光程的外置式流通池,更换极为方便;

　　10、仪器支持FLASH色谱组件与中压色谱组件,使用成本更低;

　　11、检测器同时检测4个波长的色谱峰,并可以同图显示 并指导收集;

　　12、采用1200线高分辨光栅,在紫外-可见范围具有良好的分光效能。

半制备液相色谱层析系统开机

      1、接通电脑和仪器电源(接通电源之前可先把吸头拿到要使用的流动相瓶中);

　　2、开仪器电源开关，一般先上后下，下为检测器开关;

　　3、检查流动相是否够，仪器上记录的溶剂量时候正确;

　　4、开电脑;

　　5、打开仪器联机软件进入界面，点击启动设置泵流速为10，此时仪器中应该有液体流出;

　　6、点击平衡然后点击每个波长和调整冲一段时间，待压力稳定后可以进样。

制备液相色谱特点和优点

高压—压力可达150~300Kg/cm2。色谱柱每米降的压为75 Kg/cm2以上。

高速—流速为0.1~10.0 ml/min。

***—可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。

高灵敏度—紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。

HPLC与经典液相色谱相比有以下优点：

速度快—通常分析一个样品在15~30 min，有些样品甚至在5 min内即可完成。

分辨率高—可选择固定相和流动相以达到较好分离效果。

灵敏度高—紫外检测器可达0.01ng，荧光和电化学检测器可达0.1pg。

柱子可反复使用—用一根色谱柱可分离不同的化合物。

样品量少，容易回收—样品经过色谱柱后不被***，可以收集单一组分或做制备。