半制备液相色谱层析系统如何进样品
1、将进样器扭到load朝上,吸取一定量待分离液,快速注入,做过的是吸取0.2毫升;
2、点击控制界面菜单栏中“运行控制”按钮样品信息设置信息存储路径(每次都要做);
3、扭动进样器,使处于inload状态,保留时间开始计时;
4、接峰;
5、所有峰出来后,点击菜单栏中的中断中断,准备重复进样。
液相色谱的操作步骤
1).首先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。
2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
3).正常情况下,仪器首先用***冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲***,则要二次重蒸水冲洗10-20分钟,直至色谱柱中有机相冲净为止)。
4).一般情况下,流动相冲洗20-30分钟后,仪器方可稳定,重要的是仪器基线走后,方可进样测试。
5).同时进两针标样,将其结果相比较,其结果的比值在0.98-1.02之间后,就可以正式进行样品的测试了。
6).样品测试结束后,就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲***,同样也要用重蒸水清洗10-20分钟,方可用有机相进行保护,否则,有损色谱柱。
7).关机时,先关计算机,再关液相色谱。
8).填写登记本,由负责人签字。
液相色谱法
色谱法的创始人是俄国的植物学家茨维特( M.Tswett)。1906年,俄国植物学家茨维特发表了他的实验结果:为了分离植物色素,他将含有植物色素的石油的醚提取液倒入装有碳酸钙粉末的玻璃管中,并用石油的醚自上而下淋洗,由于不同的色素在碳酸钙颗粒表面的吸附力不同,随着淋洗的进行,不同色素向下移动的速度不同,从而形成一圈圈不同颜色的色带,使各色素成分得到了分离。他将这种分离方法命名为色谱法(chromatography)。
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