制备液相色谱
制备液相色谱是一种用于食品科学技术、化学领域的分析仪器。
二元泵在高达150 ml/min的流速下实现高压梯度溶剂混合;通过高灵敏度的2489紫外/可见光检测器对目标化合物进行鉴别与分离,改善线性范围以适应高浓度样品; 可使用内径不超过50 mm的色谱柱对从几毫克到几克不等的样品进行可靠纯化; 使用易于操作的ChromScope软件,具备样品组向导、层加进样、关键馏分收集参数设置、模拟馏分收集以及自定义报告的功能。
本设备适用于快速制备复杂的混合物并获得高纯度、高回收率的产物。
制备液相知多少
色谱分析的目的
分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量;制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。为了加快分离的时间与提高分离的效率,制备色谱的的进样品量很大,导致制备色谱柱子的分离负荷的相应加大,也就必须加大色谱柱填料,增大制备色谱的直径和长度,使用的相对多的流动相。然而,当色谱柱上样品负载加大的时候,往往导致柱效急剧下降而得不到纯的产品。制备色谱,要解决容量与柱子效果之间的矛盾,对重现性也要考虑。从经济上来说。制备色谱要争取少用填料,少用溶剂,要尽可能多的得到产品。
液相色谱仪的构造
液相色谱系统主要由流动相储液瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录仪组成,其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。液相色谱的输液泵要求输液量恒定平稳,进样系统要求进样便利、切换严密。同时,由于液体流动相黏度远远高于气体,为了减低柱压,液相色谱的色谱柱一般比较粗,长度也远小于气相色谱柱。
液相色谱法的常见问题
样品准备是成功的关键;在将所有样品加载到自动进样器中之前,必须对所有样品进行过滤,这一点非常重要。当使用UHPLC时,如果不过滤样品,使用亚2微米颗粒的色谱柱进行***分离时很容易发生阻塞,这一点就尤为重要。对于流动相也是如此,尤其是在使用缓冲区的情况下。
对于样品使用正确的进样溶剂或稀释剂至关重要,溶剂强度应等于或小于流动相起始条件的强度。如果使用太强的溶剂,则会观察到峰分裂和重现性差。如果自动进样器中使用的清洗溶剂太强,可能会观察到类似的问题。
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