色谱柱的技术都有哪些?比如,封尾等,这些技术在应用时都体现在哪里?
色谱柱技术包括填料技术,封尾技术和装柱技术等,填料技术自不待言,填料的差异对色谱柱分离性能和选择性有决定性影响,色谱填料的键合相密度的不同也会影响到填料表面硅羟基外露的多少,进而影响填料的选择性。封尾技术中用到的封尾***的差异也会对色谱柱的性质产生很大的影响,如体现在色谱填料的pH耐受范围,水相耐受范围,极性强弱等。装柱技术也没有想象中的这么简单,不同固定相、不同粒径、不同柱管内径和长度,装柱工艺都有所不同,要装出紧密、稳定、均一的柱床,更多是一门艺术,需要经验积累。
液相色谱仪应用范围
它的应用范围比较大,而且有不断拓展的趋势。制备纯化样品是它的基础功能,通过色谱分离,样品中目标物质被分离出来有待进一步研究,比如分离水样中有机物、食品中以备分析等。然后是天然成分研究,有助于中药学的发展。分析前人留下的珍贵药典,通过药性研究造福人类。提高产品质量,以提高它的价值和效用,比如纯化***、纯化蛋白质制品等。还有一个方向是用于产品合成的研究,通过获得一些纯度较高的化合物将以促进合成实验的进行。
液相色谱的操作步骤
1).首先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。
2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
3).正常情况下,仪器首先用***冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲***,则要二次重蒸水冲洗10-20分钟,直至色谱柱中有机相冲净为止)。
4).一般情况下,流动相冲洗20-30分钟后,仪器方可稳定,重要的是仪器基线走后,方可进样测试。
5).同时进两针标样,将其结果相比较,其结果的比值在0.98-1.02之间后,就可以正式进行样品的测试了。
6).样品测试结束后,就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲***,同样也要用重蒸水清洗10-20分钟,方可用有机相进行保护,否则,有损色谱柱。
7).关机时,先关计算机,再关液相色谱。
8).填写登记本,由负责人签字。
那么如何选择液相色谱仪?通过哪些指标来选择呢?
下面给大家介绍几条选择液相色谱仪的方法仅供大家参考。液相色谱仪有输液泵、自动进样器、柱温箱、检测器、柱温箱等。判断液相色谱仪的指标有噪音,漂移,很小检测浓度,定性定量重复性等。
1、液相色谱仪噪音是指由液相色谱仪的电器元件、温度波动、电压的线性脉冲以及其他液相色谱仪非溶质作用产生的高频噪声和基线的无规则波动。噪音的大小直接关系到液相色谱仪检测器的检测灵敏度,噪音越大,检测的灵敏度就越低。
2、液相色谱仪检测器很小检测浓度(很小检测限)是反映液相色谱仪检测器灵敏度的重要参数。CL=2×Nd×C/H(CL:液相色谱仪很小检测浓度Nd:噪音C:液相色谱仪样品浓度很小检测浓度H:样品峰高)。
3、液相色谱仪检测器漂移是指仪器稳定后一段时间内基线漂离液相色谱仪基线原点的距离,通常用来衡量液相色谱仪稳定快慢。高的品质的液相色谱仪能在较短的时间内达到稳定,从而在一定程度上提高了液相色谱仪分析效率。
4、液相色谱仪定性定量重复性定性定量重复性主要是考核液相色谱仪稳定性的指标,这对于分析液相色谱仪样品来说是非常重要的。好的液相色谱仪其稳定性应该是十分好的,这就要求多次液相色谱仪进样保留时间及含量的一致性,这样做出来的液相色谱仪检测结果才能使人信服。
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