***液相色谱法概述

***液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的分离分析技术，是现代分离测定的重要手段。问世以来，因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生***学及临床分析。

在现代***液相色谱分析中，色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。

购买的HPLC柱验收测试时柱压过高，请问为什么？

柱压过高是HPLC柱用户很常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因：

①拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；

②把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查；

③将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，（此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动池）。这时，如果柱压仍不下降，再检查；只用于使用过的柱子。

④更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高，请与厂商联系。一般情况下，在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题。

***液相色谱法(HPLC)是上个世纪七十年代迅速发展起来的一项***、快速的分析分离技术，是现代分离测试的重要手段。色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(station phase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。

HPLC概述

液相色谱系统由泵及流路系统、进样系统、色谱柱系统以及检测器系统构成，其中进样系统可细分为手动进样与自动进样，两种进样方式均要求进样的准确性与精密度。其中手动进样系统由于人为因素对进样的准确性有很多大的影响，如人员的手动进样熟练程度等，渐渐退出市场。而自动进样系统，由于具有很高的准确度以及精密度，几乎排除人员因素的影响以及具有高通量、自动运行序列等特点而成为HPLC系统的标配。

液相色谱进样系统位于泵后，色谱柱之前的高压区域，如下图所示。流动相混合之后流经进样系统，将样品溶液带入到色谱柱内，完成进样。