液相色谱在使用过程中四大关键因素

1.液相色谱仪本身：对于仪器本身一般不会有问题，特别是刚买回来的新仪器。对于仪器本身重要的就是仪器的校验，刚买回来的仪器一般都是由卖家先对仪器做系统的确认工作（包括IQ、PQ、OQ），确认顺利通过后，再请***或省级仪器检定局的来校验，检定合格后就可以放心使用了，除此之外，一些做得好的公司每半年会对仪器进行一次的内部校验，目的就是为了保证仪器的正常可运行状态。

2.色谱条件：色谱条件一般包括流动相、色谱柱、检测波长、流速及进样量。

流动相就涉及到配制流动相所用到的水和***试液，水一般要求用超纯水或其他水的电阻率不大于18.2兆欧级别，***试液要求用色谱级别的，原因为防止水和***试液中的杂质对色谱结果的干扰。

3.操作人员：首先，作为液相操作人员，一定要认真学习夜想的说明书，掌握液相硬件和软件的操作，掌握日常的维护***，掌握基础故障的排除和维修。

4.液相安装环境：液相色谱仪应尽量安装于水平、远离振动、电磁干扰的屋内的台面上，有条件的话尽量将液相数据处理系统分隔开，一个是防止色谱基线噪音偏大，基线不稳等，一个是为减少对***的危害。

液相色谱系统特点　　

采用电子压力脉动***技术.取代了传统的机械缓冲器,有效的控制了流速的波动,使仪器的可靠性得到了进一步的提升,同时使系统的死体积降到了较小.　　

采用高精度直流伺服电机及编码器.给电子压力脉动***技术的实施提供了有力的保障,同时泵部件的体积和重量比步进电机减小很多,噪音基本得到消除.　　

输液结极模式为串联式.较并联式结很少两只单向阀,进而由单向阀故障所导致的系统故障率会减少50%，至于并联式结极交替供液所产生的流速波动同样需进行进一步的***,就并联式结极本身来讲并不能去除流速的波动.　　不同的色谱柱阻尼下流动相的输送效率问题(单向阀的启闭、流动相的压缩性等)由相应的参数进行自动调整补偿,以保证色谱系统流速的稳定性.　　可扩展功能枀为丰富,如四元高压梯度、四元低压梯度等.　　

流速范围可通过更换泵头及相应的系统参数进行调整.即可由10mL的分枂型轻松转换为50mL的半自备型.

　制备液相色谱的特点

      1、制备液相色谱采用了自动进样器与全封闭样品瓶,极大地解放了人力;

　　2、使用高精度HPLC制备色谱泵,重现性良好;

　　3、使用了仪器标配E***检测器,可用于无紫外吸收样品检测;

　　4、使用高压梯度混合,不需要脱气机,梯度基本无滞后;

　　5、可使用5u或10u的制备色谱柱,分离效能可与分析柱等同;

　　6、制备色谱采用灯-钨灯组合光源,光谱范围覆盖190nm-900nm;

　　7、带有单色仪自校正功能,波长准确性可达0.2 nm;

　　8、带有光源自检功能,管理光源寿命,提醒及时更换;

　　9、可使用各种光程的外置式流通池,更换极为方便;

　　10、仪器支持FLASH色谱组件与中压色谱组件,使用成本更低;

　　11、检测器同时检测4个波长的色谱峰,并可以同图显示 并指导收集;

　　12、采用1200线高分辨光栅,在紫外-可见范围具有良好的分光效能。

液相色谱的操作步骤

1).首先对流动相进行过滤，根据需要选择不同的滤膜，一般为有机系和水系，常用的孔径为0.20um和0.45um。

2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

3).正常情况下，仪器首先用***冲洗10-20分钟，然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲***，则要二次重蒸水冲洗10-20分钟，直至色谱柱中有机相冲净为止)。

4).一般情况下，流动相冲洗20-30分钟后，仪器方可稳定，重要的是仪器基线走后，方可进样测试。

5).同时进两针标样，将其结果相比较，其结果的比值在0.98-1.02之间后，就可以正式进行样品的测试了。

6).样品测试结束后，就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲***，同样也要用重蒸水清洗10-20分钟，方可用有机相进行保护，否则，有损色谱柱。

7).关机时，先关计算机，再关液相色谱。

8).填写登记本，由负责人签字。