多肽的分离制备,如何上量？如何增大分离度?

反相HPLC应当是很好的分离小肽方法，用CH3CN或CH3OH：H2O（95：5）做流动相，看保留如何，若无保留，建议改用其他色谱方法进行分离。

关于多肽的分离，首先要知道它的分子量大小，然后选择不同类型的填料，如孔径的大小。我们先在分析柱（4.6mm内径）上做一下实验,找到很大的分离度,这一过程的难度是很大的,要不断地改变流动相和固定相,然后再线性或非线性放大到制备,放大的倍数按分析柱的实验结果。分离后可以通过冷冻干燥得到固体。

还可以考虑离子交换来分l离。

气相色谱（GC）和***液相色谱（HPLC）

气相色谱（gas chromatography 简称GC）是分离和鉴定低分子量气体或挥发性液体的理想技术，它在工业、农业、、建设、科学研究中都得到了广泛应用。气相色谱可分为气固色谱和气液色谱。***液相色谱法的原理与气相色谱法的原理相同。但是气相色谱不适用于不挥发物质和对热不稳定物质，而液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的限制，有些样品因为难以汽化而不能通过柱子，热不稳定的物质受热会发生分解，也不适用于气相色谱法。这使气相色谱法的使用范围受到了限制。

常见色谱填料

色谱理论认为，不同的物质之间，只要存在物理、化学或生物学性质的差异，就会在不同的物相上具有不同分配系数，即可在色谱过程中得到分离、分析或测定。如果说，色谱柱是进行色谱分离的主要场所，人们常将其比喻为色谱仪的心脏；那么，色谱填料就是组成心脏的一个个细胞，因此，色谱填料的性质决定了色谱柱的性能。

根据不同的基质，色谱填料可分为：有机聚合物填料、无机基质填料、有机-无机复合型填料。目前，无机基质填料仍牢牢占据大部分市场，主要包括硅胶、氧化铝、羟基磷灰石、活性碳等。