HPLC对流动相的一般要求

流动相就比如***的血液，其质量直接影响到整个系统的正常运行与否。

© 应该使用HPLC级的溶剂，不能互相混溶的溶剂不可以直接切换！

© 注意溶剂的截止波长。截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的很低波长,低于该波长后,溶剂会有很强的紫外吸收，从而影响极限的稳定性、干扰对所分析物质的检测。

© HPLC所使用的水必须是新鲜的和经过0.45μm滤膜过滤过的。建议每天更换新鲜的水。长期不用时，必须把使用水的管路用有机的溶剂置换，防止长霉。

© 仪器使用完后要采用适当的溶剂冲洗等方法维护色谱柱和系统。如果使用了缓冲盐一定先将盐要冲洗干净。

© 当有流路堵塞时，可以尝试将之反接后冲洗。污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命，并且影响泵和系统的的性能。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液(pH 4 至7) 中尤其如此。

***液相色谱的基本原理

色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationphase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。***液相色谱法以经典的液相色谱为基础，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有颗粒极细的***固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

***液相色谱仪器的安装对环境的要求

１、电源电压要求220V

有条件的情况下尽量使用照明电，此电压比较稳定，对仪器的性能稳定性较好，在没有办法的时候，必须要用动力线路供电时，就要采取相应的办法克服或减少由于电机频繁启动，停止运行时对电网电压波动的影响。电机是***负载，停止和启动能产生很强的干扰尖脉冲电压。如请电工师傅单独从动力变压器零线以及负载较轻一些的火线上单独引线至实验室，这样可以大大减少对仪器的干扰，在经济上允许时，尽量使用交流稳压器。总之，电压低不能超过１９８V，高不超过２３０V为好。

２、对实验室的要求

a. 室内尽量有防尘设施，仪器工作时产生大量的热量，通过仪器的风扇散热，这样就有可能将周围的灰尘带入机内，在静电的作用下，附于电路上，时间长了，特别是南方，多雨季节比较潮湿，有可能给仪器工作造成不良的影响。

b. 对实验室温度的要求是温度变化相对要很小。特别是太阳光线不要直射于仪器上，否则仪器将会出现不稳定的情况。如流动相内可能产生肉眼看不到的气泡，进入系统内时，基线稳定性变差。柱子温度变化，会使保留时间有所变化，对分析的结果有一定的影响。紫外检测器的稳定时间以及工作中的稳定性都与环境温度的恒定有很大的关系。有条件时，尽量安装空调。注意，空调机供电不要与仪器供电用同一个线路。

c. 地线，消除干扰。提高仪器稳定性，保证人身安全。

***液相空白色谱柱出峰的原因？

【分析原因】1.确定检测波长，如果是末端吸收，排除三***的干扰。

2.使用100%***作为流动相，***作为样品进样，如果为基线，则说明色谱柱及系统完好。

3.然后在换流动相为10%***和90%三***水，样品为***，如果有上述“中间位置出现较大的色谱峰”，那说明八成问题在三***上，或者稀释三***的水上。

4.如果上述2、3都有“中间位置出现较大的色谱峰”，检查检测器及进样器。

5.这些还不能解决，请联系工程师