样品如果溶解度太低如何上制备HPLC?
(1)了解一下样品的性质,根据其酸碱性,极性等性质,通过调节溶剂的pH值等,以达到较好的溶解度。
(2)样品可能某种晶型难溶,这样可以加入其他溶剂以助溶。
(3)不是一定要用流动相来溶解样品,对溶解度差的样品,可以选择***,THF或DMSO等溶解样品。特别是DMSO,对一般的化合物溶解度都很好。并且在反相柱上不保留,不会造成干扰。而且DMSO的洗脱能力很弱,一般不会影响峰型。
(4)可以固体上样。
色谱材料的不同
色谱材料的可选择性十分的广泛,因为需求的不同,标准化的色谱填料产品往往达不到所需的要求,因此根据需求进行定制化产品成为了一种常见的选择
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气相色谱(GC)和***液相色谱(HPLC)
工作温度
由于化合物的热不稳定特性,HPLC操作通常在环境温度下进行,比如操作时将液相色谱柱放入恒温箱中使用。而气相色谱柱操作的环境温度并不苛刻。
工作压力
由于液体具有较高的密度和粘度,因此对于常见的分析分离,需要在5000 – 6000 psi范围内的较高压力。UHPLC系统能够在15,000 – 18,000 psi的范围内运行。GC色谱柱中的载气要求在150 – 200 psi范围内的较低压力即可。
常见色谱填料
色谱理论认为,不同的物质之间,只要存在物理、化学或生物学性质的差异,就会在不同的物相上具有不同分配系数,即可在色谱过程中得到分离、分析或测定。如果说,色谱柱是进行色谱分离的主要场所,人们常将其比喻为色谱仪的心脏;那么,色谱填料就是组成心脏的一个个细胞,因此,色谱填料的性质决定了色谱柱的性能。
根据不同的基质,色谱填料可分为:有机聚合物填料、无机基质填料、有机-无机复合型填料。目前,无机基质填料仍牢牢占据大部分市场,主要包括硅胶、氧化铝、羟基磷灰石、活性碳等。
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