购买的HPLC柱验收测试时柱压过高,请问为什么?
柱压过高是HPLC柱用户很常碰到的问题。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,您可按下面步骤检查问题的起因:
①拆去保护预柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查;
②把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查;
③将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子,(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入流动池)。这时,如果柱压仍不下降,再检查;只用于使用过的柱子。
④更换柱子入口筛板,若柱压下降,说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质,正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高,请与厂商联系。一般情况下,在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题。
***液相色谱仪器的安装对环境的要求
1、电源电压要求220V
有条件的情况下尽量使用照明电,此电压比较稳定,对仪器的性能稳定性较好,在没有办法的时候,必须要用动力线路供电时,就要采取相应的办法克服或减少由于电机频繁启动,停止运行时对电网电压波动的影响。电机是***负载,停止和启动能产生很强的干扰尖脉冲电压。如请电工师傅单独从动力变压器零线以及负载较轻一些的火线上单独引线至实验室,这样可以大大减少对仪器的干扰,在经济上允许时,尽量使用交流稳压器。总之,电压低不能超过198V,高不超过230V为好。
2、对实验室的要求
a. 室内尽量有防尘设施,仪器工作时产生大量的热量,通过仪器的风扇散热,这样就有可能将周围的灰尘带入机内,在静电的作用下,附于电路上,时间长了,特别是南方,多雨季节比较潮湿,有可能给仪器工作造成不良的影响。
b. 对实验室温度的要求是温度变化相对要很小。特别是太阳光线不要直射于仪器上,否则仪器将会出现不稳定的情况。如流动相内可能产生肉眼看不到的气泡,进入系统内时,基线稳定性变差。柱子温度变化,会使保留时间有所变化,对分析的结果有一定的影响。紫外检测器的稳定时间以及工作中的稳定性都与环境温度的恒定有很大的关系。有条件时,尽量安装空调。注意,空调机供电不要与仪器供电用同一个线路。
c. 地线,消除干扰。提高仪器稳定性,保证人身安全。
***液相色谱
***液相色谱与光谱技术联用方法的研究也一直是色谱学科的研究热点。20世纪80年代,可同时得到每个组分HPLC-UV三维谱图的二极管阵列检测器(DAD)问世,对紫外-可见光谱的快速扫描检测,使液相色谱能提供的信息大幅度增加,为模式识别等化学计量学中的许多手段提供了重要的应用领域。90年代以后,HPLC-MS、HPLC-FTIR等色谱-光谱联用技术逐渐成熟,为解决HPLC定性问题提供了多种实用、有效的手段。
为适应生命科学的发展,以制备色谱为主要对象的非线***谱获得了长足的发展,人们运用色谱法已能够制备微量而贵重的生物活性化合物。而为了满足天然产物分离制备、生物制药等方面的需要,大规模的工业色谱技术、模拟移动床色谱技术得到发展,目前,日处理量达到千克级的液相色谱系统已经随处可见。
HPLC的各系统
概括HPLC是有五大系统构成:动力系统,进样系统,分离系统,检测系统,数据分析和记录系统构成。
其中:
动力系统:泵
进样系统:六通阀和进样针,或者自动进样器
分离系统:色谱柱
检测系统:检测器,一般有紫外检测器,荧光检测器,示差折光检测器,MS检测器等等。
记录系统:电脑工作站等
连接这些设备的都是由一根根不锈钢管或者PEEK管构成。
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