色谱分离基本原理    

在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。     液相色谱的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。     由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，液相色谱使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。

半制备液相色谱层析系统开机

      1、接通电脑和仪器电源(接通电源之前可先把吸头拿到要使用的流动相瓶中);

　　2、开仪器电源开关，一般先上后下，下为检测器开关;

　　3、检查流动相是否够，仪器上记录的溶剂量时候正确;

　　4、开电脑;

　　5、打开仪器联机软件进入界面，点击启动设置泵流速为10，此时仪器中应该有液体流出;

　　6、点击平衡然后点击每个波长和调整冲一段时间，待压力稳定后可以进样。

液相色谱仪分类方法

   　1、按分离目的可分：实验室液相色谱仪和工业液相色谱仪。

　　2、按固定相物理状态可分：液液色谱仪和液固色谱仪。

　　3、按色谱柱形状可分：填充柱液相色谱仪和平板液相色谱仪。

　　4、按分离原理可分：吸附液相色谱仪、分配液相色谱仪、离子交换液相色谱仪和凝胶液相色谱仪。

　　注：①吸附色谱：利用固体吸附表面对不同组分物理吸附性能的差异达到分离的色谱。②分配色谱：利用不同的组分在两相中有不同的分配系数以达到分离的色谱。③离子交换色谱：利用离子交换原理的达到分离的色谱。

液相色谱仪的工作原理是什么?

利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。

使用液相色谱时，液体待检测物被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由于被测物种不同物质与固定相的相互作同，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，以后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。