***液相色谱基线漂移的原因
(1)柱的温度波动。即使是微小的温度变化也会导致基线波动。通常影响差异检测器、电导检测器、UV检测器或其它光电类检测器的较低灵敏度。
(2)***色谱流动相不均匀流动相条件变化,引起的基线漂移大于温度变化引起的基线漂移。
(3)污染或气体循环池
(4)探测器出口堵塞。(高压导致循环水池窗口的爆裂,产生噪声基线)
(5)不正确的流量比或流量变化
(6)柱的平衡是缓慢的,特别是当移动相发生变化时。
(7)由低质量的溶剂污染、变质或制备。
(8)个样品具有较强的保留力(高K‘值)至汕头峰
(9)洗脱样品,显示基线逐渐增加。回收溶剂不使用,不推广.. 探测器未调整..
***液相色谱法概述
***液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的分离分析技术,是现代分离测定的重要手段。问世以来,因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生***学及临床分析。
在现代***液相色谱分析中,色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏,选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间,并且使方法更具稳定性。
***液相色谱仪器的安装对环境的要求
1、电源电压要求220V
有条件的情况下尽量使用照明电,此电压比较稳定,对仪器的性能稳定性较好,在没有办法的时候,必须要用动力线路供电时,就要采取相应的办法克服或减少由于电机频繁启动,停止运行时对电网电压波动的影响。电机是***负载,停止和启动能产生很强的干扰尖脉冲电压。如请电工师傅单独从动力变压器零线以及负载较轻一些的火线上单独引线至实验室,这样可以大大减少对仪器的干扰,在经济上允许时,尽量使用交流稳压器。总之,电压低不能超过198V,高不超过230V为好。
2、对实验室的要求
a. 室内尽量有防尘设施,仪器工作时产生大量的热量,通过仪器的风扇散热,这样就有可能将周围的灰尘带入机内,在静电的作用下,附于电路上,时间长了,特别是南方,多雨季节比较潮湿,有可能给仪器工作造成不良的影响。
b. 对实验室温度的要求是温度变化相对要很小。特别是太阳光线不要直射于仪器上,否则仪器将会出现不稳定的情况。如流动相内可能产生肉眼看不到的气泡,进入系统内时,基线稳定性变差。柱子温度变化,会使保留时间有所变化,对分析的结果有一定的影响。紫外检测器的稳定时间以及工作中的稳定性都与环境温度的恒定有很大的关系。有条件时,尽量安装空调。注意,空调机供电不要与仪器供电用同一个线路。
c. 地线,消除干扰。提高仪器稳定性,保证人身安全。
***液相色谱
***液相色谱与光谱技术联用方法的研究也一直是色谱学科的研究热点。20世纪80年代,可同时得到每个组分HPLC-UV三维谱图的二极管阵列检测器(DAD)问世,对紫外-可见光谱的快速扫描检测,使液相色谱能提供的信息大幅度增加,为模式识别等化学计量学中的许多手段提供了重要的应用领域。90年代以后,HPLC-MS、HPLC-FTIR等色谱-光谱联用技术逐渐成熟,为解决HPLC定性问题提供了多种实用、有效的手段。
为适应生命科学的发展,以制备色谱为主要对象的非线***谱获得了长足的发展,人们运用色谱法已能够制备微量而贵重的生物活性化合物。而为了满足天然产物分离制备、生物制药等方面的需要,大规模的工业色谱技术、模拟移动床色谱技术得到发展,目前,日处理量达到千克级的液相色谱系统已经随处可见。
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