低温生物***的筛选分离

筛选

工业发酵的有用***，其筛选步骤包括***分离、初筛和复筛，挑选具有某种能力的有用***。

分离

首先是从土壤或腐生植物中收集含菌样品，用无菌水稀释后，涂布于置有适宜***或霉菌生长的琼脂培养基平皿上，并将其倒置于恒温箱中，培养一定时间，平皿上长出的许多单个菌落（单一微生物的集落）经分别分离后即为各种纯种菌株，简称纯种，移种至试管斜面培养基上，置4℃冰箱备用。

低温生物***——保存方法介紹

脱水存法

①沙土保存法，能产孢子的***及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合，经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;灭菌2～3次，烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子，用无菌蒸馏水2～2.5ml制成孢子悬液，吸取少许加入沙土管中，经真空抽干，外观呈松散状态,于4℃冰箱保存，保存期可达5～7年。

② 冷冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂（一般用脱脂牛奶）相混合，放在安瓿管内于-20～-30℃的乙醇浴中速冻。然后，在低温下用真空泵抽干，并用氧化磷或干冰使水汽结冻，熔封安瓿管，于低温下保存。保存期可达5～10年之久。

③ 石蜡油封存法，在斜面***培养物上,倒上灭菌后的石蜡油，高出斜面1cm，于4℃冰箱或低温干燥处保存，此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物，保存期为一年以上。

低温生物***的存储及施用规范

储存和施用技术严格

温度、光照、酸碱度和渗透压等环境因素都能影响到微生物的存活。储存微生物肥料应选择避光、低温环境条件。施用微生物肥料应防止长时间暴露在阳光下，以免紫外线杀灭肥料中的微生物；微生物肥料不应直接与化肥混合施用，以免因渗透压的改变而***或杀灭其中的有效菌等。

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低温生物***——常用***介绍

固氮菌

固氮菌属于***的一科。菌体杆状、卵圆形或球形，无内生芽孢，革兰氏染色阴性。好氧，厌氧，兼性厌氧均有，有机营养型，能固定空气中的氮素。包括固氮菌属、氮单孢菌属、拜耶林克氏菌属和德克斯氏菌属。固氮菌肥料多由固氮菌属的成员制成。氮是植物生长不可缺少的物质，是合成蛋白质的主要来源，固氮菌擅长从空中取氮，它们能把空气中植物无法吸收的氮气转化成氮肥，源源不断地供植物享用。自生固氮微生物是指在土壤中能够利用的是土壤中的腐殖质***进行固氮的微生物，其中，多数是一类叫做自生固氮菌的***。经过两三天的培养，成对的菌体呈“8”字形排列，并且外面有一层厚厚的荚膜。自生固氮菌中，人们应用得较多的是圆褐固氮菌(Azotobocter chroococcum）。圆褐固氮菌具有较强的固氮能力，并且能够分泌生长素，促进植株的生长和果实的发育，因此，将圆褐固氮菌制成菌剂，施用到土壤中，可以提高农作物的产量。

地衣芽孢菌

提高作物抗病、抗寒、抗旱能力；增加土壤养分、改良土壤结构、提高化肥利用率；促使土壤中的有机质分解成腐殖质，刺激作物生长。促进作物生长、成熟、降低成本、增加产量、提高收入；有一定的固氮、解磷、解钾作用。