低温生物***的筛选分离

筛选

工业发酵的有用***，其筛选步骤包括***分离、初筛和复筛，挑选具有某种能力的有用***。

分离

首先是从土壤或腐生植物中收集含菌样品，用无菌水稀释后，涂布于置有适宜***或霉菌生长的琼脂培养基平皿上，并将其倒置于恒温箱中，培养一定时间，平皿上长出的许多单个菌落（单一微生物的集落）经分别分离后即为各种纯种菌株，简称纯种，移种至试管斜面培养基上，置4℃冰箱备用。

低温生物***的作用

减少化肥的使用量、提高肥料利用率

使用微生物肥料后可以减少化肥的施用餐。由于微生物肥料可以提高土壤的养分含量，因此在相同地力水平的土壤上可以减少化肥的用量，并且获得等效的增产效果。微生物肥料在提高肥料利用率方面有明显作用，根据作物种类、土壤类型和气候条件，微生物肥料与化肥的合理配合，既能增加作物产量，又能提高肥料利用率，这不仅有经济上的意义，而且有生态学和环境保护的意义。除上述作用外．微生物肥料还具有如下作用：施用后不会造成***物质在作物体内的积累；对农业生态环境无不良影响，有的还具有土壤净化剂***，降低土壤中过多积累的有机物质。如分解纤维素、木质素等微生物肥料，可对城市生活垃圾、农牧业有机废弃物进行快速发酵。

低温生物***的特点

微生物肥料的作用基础是起特定作用的微生物。这些微生物通过它们的生长繁殖和生理活动，直接或间接地影响植物的生理代谢或土壤环境条件。为了充分发挥微生物肥料作用，微生物肥料应具备如下特点。

针对性强，适用范围得当

不同的微生物肥料适用于相应的作物和特定的土壤环境条件。在生产实践中，许多使用者对此并不十分注意，在我国曾有错误地将大豆根瘤菌剂应用于小麦、玉米的情况 。

低温生物***——常用***介绍

侧孢芽孢菌

在延迟期， 短芽孢菌为革兰氏染色阴性，菌体呈细长的杆状；在对数生长期，为革兰氏染色阳性，菌体成短而粗的杆状；在静止期，革兰氏染色又转为阴性，菌体成细长的杆状，偶尔也能观察到椭圆形的芽孢。图1是50号菌用1%H2SO4(pH6.8)负染后的电镜照片：菌体杆状、周生鞭毛、大小约0.88μm×2.2μm。

作为非脊椎动物的病原菌，有关研究人员曾报道了这种***的杀线虫能力，由于所报道的这些侧孢短芽孢菌菌株都不产生伴孢晶体，所以这些菌株的杀线虫毒力因子并非来自于具有特征性的伴孢晶体。然而，***irnova TA，et al.分离到了2株能形成大的伴孢晶体的侧孢短芽孢菌菌株，这两株菌显示出很强的杀昆虫能力，研究证实，这种能力与菌体在形成芽孢过程中的伴孢晶体相关。有趣的是，Singer的实验表明，一株侧孢短芽孢菌的杀线活性源于一个热稳定蛋白的毒性。所有这些研究表明，不同侧孢短芽孢菌菌株拥有不同的线虫致病因子。牛秋红研究小组分离到的侧孢短芽孢菌G4菌株具有显著的杀线虫功能，但其并不产生伴孢晶体。从该菌株的发酵液里提取的粗蛋白酶液在12h内能杀掉所有测试线虫并在24h内完全降解。从侧孢短芽孢菌G4菌株中纯化出的丝氨酸胞外蛋白酶可水解多种底物，包括胶原和线虫体壁，具有很强的杀线虫能力，***病理电镜实验证实这种蛋白酶严重***了线虫体壁。而且，蛋白酶将线虫体壁分解成为一些氨基酸或小肽，这些营养物使病原***更好的生长繁殖。该蛋白酶***异源表达的菌株表现出了明显的杀线虫活性，重组蛋白酶在体外对线虫体壁降解，而蛋白酶缺失菌株丧失了大部分的杀线活性，死的线虫在生测中保持了完整的体壁，表明蛋白酶在线虫侵染中起主要作用。