低温生物***——筛选模型

根据不同的筛选目的，采用不同的筛选模型。如常规筛选产生菌的方法是将土壤中分离所得的纯种，在含有琼脂培养基的平皿上培养后，用打孔器将菌块移至含有试验菌的琼脂培养基上，在适宜的温度下培养一定时间后取出，如在菌块的周围有透明的抑菌圈，则表明此***具有产生***试验菌生长的抑菌物质的能力。所得***经过摇瓶液体发酵，选出生产能力高的***。另一方面对所提取的进行结构分析、药理试验及临床试验等，确为有效者，即可作为生产***。又如筛选脂肪酶生产***的方法是将分离所得的霉菌涂布于含有牛脂的琼脂培养基上，恒温培养一定时间，如菌落周围出现透明圈的，则该菌具有分解脂肪的能力，进一步作摇瓶发酵测定酶活力，挑选产量高者作生产***的出发菌株。

低温生物知多少？

实验室的传代保藏过程

1. 按说明书要求复溶菌粉，转种于适当的增菌培养基内（G1），复壮后转接至平板上，并于适当温度下培养适当时间，分离出单个纯种菌落，此为第2代（G2）。

2. 鉴定完成后，挑取纯菌落制成浓菌悬液用于制备甘油冷冻管，同时挑取纯菌落转接斜面作为工作用。此时，保藏为第2代，但工作用则为第三代。

3. 将第2代管冷冻保存，将工作用于适当温度下培养适当时间后可用于试验。

4. 取一支冷冻保存的G2代转种于平板和斜面培养基上，平板上的制成冷冻保藏管第三代（G3），斜面培养基经适当温度下培养适当时间后用作工作用（W3）。

5. 将第三代（G3）冷冻或低温保存，将生长、转种后的G2经灭菌处理后丢弃。

6. 当工作用代数小于5时，可直接用上一代工作用转接下一代工作用，如W3可直接转接为W4。

7. 按上述程序操作，直至G4转为W5为止，需重新开启安瓿，再重复上述操作程序、保藏和使用。

以上方法中，被分为两类。传代用和工作用，传代用用于甘油冷冻管法保藏，工作用用斜面低温保藏法保藏。

实验证明，甘油冷冻管的有效期至少为2年，但其主要适用于***（需氧）、酵母菌的传代、保藏、***和芽孢类***则需应用其它方法。

低温生物***的特点

种类明确，作用清楚

微生物肥料起作用的微生物必须经过严格的鉴定，其分类地位明确，对人、畜、植物无害，也不会***土壤微生态环境。例如，某些假单胞菌在生长和代谢过程中，可以产生促进植物生长的物质，但也产生某些***物质，有的甚至是人、动物或植物的病原菌，这类微生物就不能作为微生物肥料。事实上，曾有使用未经严格鉴定的微生物而造成危害的教训。“有效、无害”是生产、施用微生物肥料的原则，许多***对此有明确的立法。

生物***如何才能发挥出好的效果？

加强环境调控 保持***活性

有机肥施入土壤后，必须有微生物发酵腐熟，才能起到改良土壤，提高土壤透气性的作用。

当前，很多菜农高温闷棚前也使用生物菌剂，但因为使用不当，常常影响闷棚效果，甚至根本没有完成粪肥腐熟，蔬菜定植后又出现烧根问题，这是怎么回事呢？

这就要从生物菌的特性说起。要想生物菌剂发挥应有的作用，首先要确保生物菌存活，并快速增殖达到一定数量，才能充分发挥其作用。因此，菜农一定要深入了解生物菌特性，尽量创造适宜生物菌存活的条件。