低温生物***的筛选分离

筛选

工业发酵的有用***，其筛选步骤包括***分离、初筛和复筛，挑选具有某种能力的有用***。

分离

首先是从土壤或腐生植物中收集含菌样品，用无菌水稀释后，涂布于置有适宜***或霉菌生长的琼脂培养基平皿上，并将其倒置于恒温箱中，培养一定时间，平皿上长出的许多单个菌落（单一微生物的集落）经分别分离后即为各种纯种菌株，简称纯种，移种至试管斜面培养基上，置4℃冰箱备用。

低温生物***——制备

也称种子制备，是指***在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产***的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。种子制备包括孢子制备和菌丝体制备（见图），其中(1)～(4)为孢子制备过程。保存在沙土管或冷冻管中的生产***，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天(或较长时间)。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子，对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基。将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。菌孢子的培养基大多是采用麸皮或豌豆浸出液、牛肉膏及无机盐与琼脂制成的。将斜面孢子接入扩大的扁瓶孢子培养基中,于28～37℃培养5～14天。所获得的大量孢子可直接作为种子罐 (6)的种子。如果有些生产***不产孢子，如产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶（5）液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆等）,及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐(7)的种子应是生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

低温生物产品特性

自古以来生物的产品具有高选择性、高转化率和高转化速度的特性，可以在常温、低压或中压的发酵条件下进行生产。该产品还具有以下特点：

1、易工程化：采用通用性强的发酵工艺和设备，适应规模化生产；

2、高度灵活：代谢对H?/CO/CO?没有比例要求；

3、条件温和：常温、低压或中压等温和条件下操作；

4、耐受性高：抗杂菌、对硫化物等常规杂质具有较强耐受性；

5、高经济性：生产项目建设***低，1-2年可收回建设***，***回报率高；

6、绿色生产：利用H?、CO和CO?气体，固定二氧化碳, 节能减排降污染，能耗低，低水耗，环境友好。

低温生物***——特点介绍

***的有效性

***的有效性微生物是微生物肥料的核心，这些***是针对不同作物和土壤类型，通过人工筛选或生物工程技术选育、改造并经过大量科学试验后，获得的优良菌株。由于核心***或菌株生理生化功能的差异，不同微生物肥料***也不一致。以根瘤菌为例，菌株固氮能力差异很大，有的菌株甚至不具固氮能力。