低温生物***——制备

也称种子制备，是指***在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产***的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。种子制备包括孢子制备和菌丝体制备（见图），其中(1)～(4)为孢子制备过程。保存在沙土管或冷冻管中的生产***，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天(或较长时间)。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子，对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基。将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。菌孢子的培养基大多是采用麸皮或豌豆浸出液、牛肉膏及无机盐与琼脂制成的。将斜面孢子接入扩大的扁瓶孢子培养基中,于28～37℃培养5～14天。所获得的大量孢子可直接作为种子罐 (6)的种子。如果有些生产***不产孢子，如产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶（5）液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆等）,及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐(7)的种子应是生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

耐低温生物-选择开碧源

水医生--开碧源从17年开始就和清华大学及北京云阳张环保设备厂联合将耐低温从实验室的小试走向规模化的中试，在北京顺义马坡工业区污水厂进行耐低温的耐低温中试验证，俩套一模一样AO氧化接触工艺的日处理10吨的污水中试设备，从5月份开始同时培养微生物，一套投加耐低温生物，一套没有投加耐低温，驯化培养运行30天后，开始定期取样检测，经对比验证，添加耐低温的中试设备，从挂膜速度及COD氨氮磷及总氮的去除率，都比没有添加耐低温的中试设备高10--30%，中试一直连续运行到冬天，没有添加耐低温的中试设备做保温和加盖处理，添加耐低温的中试设备没有做保温和加盖处理。，没有做保温的中试设备，水温达到3.5度（保持在5度左右），水面已经结冰，做保温加盖的中试设备，水面没有结冰，水温保持在10度左右，进水量和进水水质指标都一样，持续低温运行，并连续取样化验，做保温的中试设备，进水和出水几乎一致，证明：普通在水温10度的时候，已经停止工作，几乎没有任何降解能力。

低温生物***——常用***介绍

球形芽孢菌

球形芽孢菌是一种在自然界中广泛分布、形成亚末端膨大孢子囊和球形芽孢的好气芽孢菌。在已发现的49个鞭毛型中有9个(H1、H2、H3、H5、H6、H9、H25、H26和H48)的菌株对蚊幼虫有一定的杀毒作用。其中大部分高毒力菌株属型H5、H6和H25，如2362、1593、2297、Ts-1和C3-41等[6～11]。根据其杀蚊活性，这些菌株分为高毒力菌株和低毒力菌株，所有***菌株都具有较高的DNA同源性（>79%），属DNA同源型IIA型。

球形芽孢菌对不同蚊幼虫的杀毒作用主要是由其产生的毒蛋白实现的。现已证明在其生长发育过程中能产生两类不同毒蛋白，一类是存在于所有高毒力菌株中的晶体毒蛋白；另一类是存在于低毒力菌株中部分高毒力菌株中的Mtx素蛋白。