低温生物***——***分离方法

寄主分离法即从生长有某种***的寄主体上（如茯苓、木耳木段）取下木片，进行分离的方法。如木耳制种时，可选朵大、出耳多、质厚的耳棒（即长有木耳的木段）。采集后，削去耳根下的树皮，将其横断面锯成1 厘米厚的木片，在无菌条件下，切去无耳菌丝部分，留下有耳菌丝部分，浸入水中1 分钟，取出再用无菌水冲去木片上的液体。然后，用解剖刀将木片切成0 . 5 厘米的小块，放入斜面培养基内，置24 ～26 ℃下培养，及时淘汰杂菌，选取纯菌丝进行移植培养，即得***。

低温生物***——常用***介绍

侧孢芽孢菌

在延迟期， 短芽孢菌为革兰氏染色阴性，菌体呈细长的杆状；在对数生长期，为革兰氏染色阳性，菌体成短而粗的杆状；在静止期，革兰氏染色又转为阴性，菌体成细长的杆状，偶尔也能观察到椭圆形的芽孢。图1是50号菌用1%H2SO4(pH6.8)负染后的电镜照片：菌体杆状、周生鞭毛、大小约0.88μm×2.2μm。

作为非脊椎动物的病原菌，有关研究人员曾报道了这种***的杀线虫能力，由于所报道的这些侧孢短芽孢菌菌株都不产生伴孢晶体，所以这些菌株的杀线虫毒力因子并非来自于具有特征性的伴孢晶体。然而，***irnova TA，et al.分离到了2株能形成大的伴孢晶体的侧孢短芽孢菌菌株，这两株菌显示出很强的杀昆虫能力，研究证实，这种能力与菌体在形成芽孢过程中的伴孢晶体相关。有趣的是，Singer的实验表明，一株侧孢短芽孢菌的杀线活性源于一个热稳定蛋白的毒性。所有这些研究表明，不同侧孢短芽孢菌菌株拥有不同的线虫致病因子。牛秋红研究小组分离到的侧孢短芽孢菌G4菌株具有显著的杀线虫功能，但其并不产生伴孢晶体。从该菌株的发酵液里提取的粗蛋白酶液在12h内能杀掉所有测试线虫并在24h内完全降解。从侧孢短芽孢菌G4菌株中纯化出的丝氨酸胞外蛋白酶可水解多种底物，包括胶原和线虫体壁，具有很强的杀线虫能力，***病理电镜实验证实这种蛋白酶严重***了线虫体壁。而且，蛋白酶将线虫体壁分解成为一些氨基酸或小肽，这些营养物使病原***更好的生长繁殖。该蛋白酶***异源表达的菌株表现出了明显的杀线虫活性，重组蛋白酶在体外对线虫体壁降解，而蛋白酶缺失菌株丧失了大部分的杀线活性，死的线虫在生测中保持了完整的体壁，表明蛋白酶在线虫侵染中起主要作用。

生物***如何才能发挥出好的效果？

加强环境调控 保持***活性

有机肥施入土壤后，必须有微生物发酵腐熟，才能起到改良土壤，提高土壤透气性的作用。

当前，很多菜农高温闷棚前也使用生物菌剂，但因为使用不当，常常影响闷棚效果，甚至根本没有完成粪肥腐熟，蔬菜定植后又出现烧根问题，这是怎么回事呢？

这就要从生物菌的特性说起。要想生物菌剂发挥应有的作用，首先要确保生物菌存活，并快速增殖达到一定数量，才能充分发挥其作用。因此，菜农一定要深入了解生物菌特性，尽量创造适宜生物菌存活的条件。