大肠菌群的菌落计数检验方法

大肠菌群的菌落计数

检验方法

用灭菌吸管吸取待检样液1.0mL，加入无菌平内。每个样品接种三个连续稀释度，每个稀释度接种两个平皿。于每个加样平内倾注15mL45~50℃的Aiiz-gal琼脂，迅速轻轻转动平，使混合均匀。待琼脂深固后，再倾注3mL-5mL Aliz-sal琼脂覆盖表面。同时将Aliz-gal琼脂倾人加有1mL上述无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的无菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后，翻转平板，干37+1℃培养箱培养18h-24h。取出平板，计数紫色(或红色)菌落。

培养基检验原理:胰酪胨提供碳氮源、***和矿物质满足***生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾和磷酸氡二钾是培养基pH缓冲剂:月桂基***钠可***革兰氏阳性菌的生长;大肠菌群可产生-半乳糖苷酶，分解液体培养基中的酶底物茜素-B-D-半乳糖苷(Aliz-gal)，使素游离并与固体培养基中的铝、钟、铁、钱离子结合形成坚备(或红色)的罄合物，使菌落呈现相应的颜色。

大肠超标会有哪些危害?

　食品安全是国人的大事，因为民以食为天，人们每天都要吃食物，如果食物的质量关把不好，会直接导致健康出问题。这次发现食物的大肠超标，确实令人担忧。虽然，大肠是和人类共存的，但是如果大肠的数量过多，依然会对人的胃肠造成伤害。我们的食品是允许少量的大肠存在的，只要是符合***检测的标准就不会伤到健康，那我们来看一下大肠超标会有哪些危害？

　　1、引起肠道外。大肠离开***之后，很容易引起其他的，可以引起、、盂等等，大肠还可能引发腹膜炎、阑尾炎，有一些抵抗力差的人或者儿童，大肠之后甚至可能会进入血液引起。对于刚出生30天之内的***，如果大肠，可能会导致大肠性，即使也会影响孩子后天的智力发育。

　　2、 导致胃肠不适，出现腹泻。肠道内的大肠超标会直接导致胃肠道症状，会出现胀气等，的表现是腹泻，轻度的腹泻可以自愈，但是严重的腹泻可能会持续好几天，需要经过才能痊愈。

发酵法检测食品中大肠群的一种比较传统的方法

不同方法其检测原理和检测手段的不同，都会影响检测的灵敏度、准确性和快速性。

发酵法

　　发酵法是检测食品中大肠群的一种比较传统的方法，这种技术已经得到的普遍认可。有代表性的是美国环保局（EPA）和法准化联合会（FSA）分别早在20世纪90年代就已批准在本国实施该技术，并为此制定了相应的判别标准[1]。

　　目前发酵法检测食品中大肠群主要采用的是GB4789.3-20肠菌群测定，是用月桂基***盐胰蛋白胨（LST）配置的肉汤管放在温度为（36±1）摄氏度的恒温培养箱中培养（24±2）小时，先观察倒管内是否有气泡产生，然后（24±2）小时后进行产气酵试验，如果未产气则需要继续培养（48±2）小时，产气者进行酵试验。在酵试验中，用接种环从产气的LST肉汤管中各取取培养物1环，移到含有煌绿乳糖胆盐（BGLB）的肉汤管中，放在（36±1）℃恒温培养箱中培养（48±2）h，观察产气的情况。产气的就计为大肠菌群阳性管。由于该方法操作繁锁，耗费较大的物力财力人力，所以不太适应大量检测工作的需求[2]。