Bradford蛋白质定量***承诺守信 友名生物
作者:友名生物2022/2/17 3:01:54







目前,传统的获得多***转基yin植株的方法包括共转化,再转化W及杂交。但是运 些传统方法的缺点是共转化的两个或多个***的转化效率是不可控的,每个***在目标***组的插入位置也是不一样的,而***分离会导致不稳定的遗传后代。另外再转化W及杂 交都是耗时的过程。

而为了克服运些缺点,具有单个或者多个转录盒子的多***载体应运而生并成功 应用于多个研究,但是运些多***表达载体的应用没有得到广泛的推广应用。因为大部分 的方法需要亚克1隆W至于克1隆所耗时间拉长;没有标签或者报告***与目标***相连,运 样就导致蛋白或者***的鉴定比较困难;另外,某些方法如采用同尾酶构建多***载体的方法受限于可用的酶的数量不多运个问题。所W构建多***载体需要根据研究目的而设计。



folin―酚***法(lowry法)是蛋白质测定法中较灵敏的方法之一。过去此法是应用相对广泛的一种方法,由于其***乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种***,即folin―酚***,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深兰色的原因是:在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。folin―酚***中的磷钼酸盐―磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深兰色(钼兰和钨兰的混合物)。在一定的条件下,兰色深度与蛋白的量成正比。



连接方法用约20种氨基酸作原料,在细胞质中的核糖体上,将氨基酸分子互相连接成肽链。一个氨基酸分子的氨基和另一个氨基酸分子的羧基,脱去一分子水而连接起来,这种结合方式叫做脱水缩合。通过缩合反应,在羧基和氨基之间形成的连接两个氨基酸分子的那个键叫做肽键。由肽键连接形成的化合物称为肽。检测方法分别向甲、乙两支试管加入3毫升蛋清稀释液和清水,再依次向两支试管中加入双缩脲***A液和B液。观察甲、乙两试管中溶液发生的颜色变化。上述的演示实验结果表明,双缩脲***与蛋白质呈现紫色反应。



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