腺病毒载体系统承诺守信「多图」
作者:友名生物2022/2/13 3:14:04







PEG法

  其基本原理是在二价阳离子(Mg2+、Ca2+等)存在的情况下,PEG能够有效地诱导DNA产生颗粒状沉淀,从而使细胞膜能够通过内吞噬作用吸收这种DNA颗粒。

  1993年Golovkin等用PEG法将H89的原生质体与含有鼠二氢叶酸还原酶(DHFR)突变***(氨甲1喋呤抗性)的质粒共培养,此***插入了玉米Ds1转座子中。筛选得到的愈伤***,在不含激1素的培养基上再生长出植株。同年Omirulleh等用PEG法将外源***导入到了HE89的原生质体中,建立了植株再生的转化体系。

  PEG法虽然转化效率较高,但必须以裸1露的原生质体为受体,而且还受到***型的限制。





第yi代腺病毒载体:一般将E1或E3***缺失的腺病毒载体称为第yi代腺病毒载体,此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎1症反应和免1疫反应,纯化后可以安全使用,体内表达周期可达4周。

第二代腺病毒载体:E2A或E4***缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体,产生的免1疫反应较弱其载体容量和安全性方面有所改进,但病毒包装难度和出毒和病毒滴度下降厉害,应用相当局限。

第三代腺病毒载体:第三代载体缺失了全部的(无病毒载体,gutless vector)或大部分腺病毒***(微型腺病毒载体,mini Ad),仅可保留ITR和包装信号序列。第三代腺病毒载体***大可插入35kb的***,病毒蛋白表达引起的细胞免1疫反应进一步减少,载体中引入核基质附着区***可使得外源***保持长期表达,并增加了载体的稳定性。这一载体系统需要一个腺病毒突变体作为辅助病毒。



在格雷戈尔·孟德尔之前,人们曾认为遗传是一个混合过程,但是孟德尔证实存在一种不可分割和***的遗传单位,后来人们证实这种遗传单位就是存在于染色体上的***——一段DNA序列。孟德尔在***水平上揭示了有性生殖的遗传过程(称之为“分离定律”与“自由组合”定律),虽然他那时并不知道***的真实存在形式 [1]  。注意***和DNA是完全不同的概念。



***是控制生物性状的基本遗传单位。19世纪60年代,奥地利遗传学家格雷戈尔·孟德尔就提出了生物的性状是由遗传因子控制的观点,但这仅仅是一种逻辑推理。20世纪初期,遗传学家摩尔根通过果蝇的遗传实验,认识到***存在于染色体上,并且在染色体上是呈线性排列,从而得出了染色体是***载体的结论。1909年丹麦遗传学家约翰逊(W. Johansen,1859~1927)在《精密遗传学原理》一书中正式提出“***”概念。



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