腺病毒载体应用优势
腺病毒载体转0***效率较高,体外实验通常接近100%的转导效率;可转导不同类型的人***细胞,不受靶1细胞是否为分裂细胞所限;容易制得高滴度病毒载体,在细胞培养物中重组病毒滴度可达(10E+11)/ml;进入细胞内并不整合到宿主细胞***组,仅瞬间表达,安全性高。因而,腺病毒载体在***治1疗临床试验方面有了越来越多的应用,成为继逆转录病毒载体之后广泛应用且非常具前景的病毒载体。
腺病毒的***组
腺病毒的***组以线性的双链DNA形式存在,由蛋白VII和一种称为mu的小蛋白紧密地环绕在其周围,起到类组蛋白样的作用。另一种蛋白V将这种DNA-蛋白复合物连接起来,并通过蛋白VI与病毒衣壳连接在一起。在两条链的5′端各以共价键结合着一个被称为DNA末端蛋白(pTP)复合物(DNA-TPC)的特化的结构,与腺病毒copy密切相关。腺病毒***组的两端各有一段100bp的反向末端重复序列(ITR),是copy的起始位点。在左端ITR的3′侧有一段长约300bp的包装信号(ψ)介导腺病毒***组包装入病毒衣壳。对腺病毒而言,只有包括两端的ITR和包装信号(ψ)的约0.5kb的序列是顺式作用元件,也就是说必须由腺病毒载体自身携带,而其他的30余种蛋白都可以通过辅助病毒(或细胞)反式补足。
腺病毒感1染后可获得对同型的持久免1疫力
与绝大多数呼吸道感1染的病原相比,机体对腺病毒的再感1染能产生有效的免1疫。起保护作用的是体内产生的循环中和抗1体。正常的健康***一般也具有多型的抗1体。约40%~60%的6~15岁的人具有1、2和5型中和抗1体,但3、4和7型抗1体很少。母亲的抗1体能保护***免除严重的腺病毒呼吸道感1染。
腺病毒传播特点
宿主范围广对人致病性低,腺病毒载体系统可广泛用于人类及非人类蛋白的表达。腺病毒可感1染一系列哺乳动物细胞,因此在大多哺乳动物细胞和***中均可用来表达重组蛋白。特别需要指出的是:腺病毒具有嗜上皮细胞性,而人类的大多数的肿1瘤就是上皮细胞来源的。另外,腺病毒的copy***和致病***均已相当清楚,在人群中早已流行(70-80%成***内都有腺病毒的中和抗1体存在)。人类感1野1生型腺病毒后仅产生轻微的自限性症状,且病毒唑cure有效。
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