PEG法

　　其基本原理是在二价阳离子（Mg2+、Ca2+等）存在的情况下，PEG能够有效地诱导DNA产生颗粒状沉淀，从而使细胞膜能够通过内吞噬作用吸收这种DNA颗粒。

　　1993年Golovkin等用PEG法将H89的原生质体与含有鼠二氢叶酸还原酶（DHFR）突变***（氨甲1喋呤抗性）的质粒共培养，此***插入了玉米Ds1转座子中。筛选得到的愈伤***，在不含激1素的培养基上再生长出植株。同年Omirulleh等用PEG法将外源***导入到了HE89的原生质体中，建立了植株再生的转化体系。

　　PEG法虽然转化效率较高，但必须以裸1露的原生质体为受体，而且还受到***型的限制。

腺病毒载体应用优势

腺病毒载体转0***效率较高，体外实验通常接近100%的转导效率；可转导不同类型的人***细胞，不受靶1细胞是否为分裂细胞所限；容易制得高滴度病毒载体，在细胞培养物中重组病毒滴度可达（10E+11）/ml；进入细胞内并不整合到宿主细胞***组，仅瞬间表达，安全性高。因而，腺病毒载体在***治1疗临床试验方面有了越来越多的应用，成为继逆转录病毒载体之后广泛应用且非常具前景的病毒载体。

腺病毒是无胞膜的线性双链DNA病毒，目前腺病毒科分为5个属，有多种型别的腺病毒已经被开发为***转移载体，在基础科研、***cure和载体疫1苗领域得到广泛应用。

腺病毒的***组长约26-46kb，这使得腺病毒载体的构建与常见质粒载体(一般长度小于10kb)不同。太长的***组使得在腺病毒载体上富集一个多克1隆位点非常困难。针对重组腺病毒的构建，开发了多种方法。

目前已有的腺病毒载体系统均存在缺陷，有些构建步骤繁琐，耗时较长，有些在重组病毒中引入了不必要的外源序列，有些不能用于重组腺病毒的反向遗传改造。近年来，新的生物特性不同的腺病毒不断被发现，因此，本领域对构建过程更加快捷简便的、人工改造更加方便灵活的腺病毒载体系统和重组病毒构建方法存在需求。

***是控制生物性状的基本遗传单位。19世纪60年代，奥地利遗传学家格雷戈尔·孟德尔就提出了生物的性状是由遗传因子控制的观点，但这仅仅是一种逻辑推理。20世纪初期，遗传学家摩尔根通过果蝇的遗传实验，认识到***存在于染色体上，并且在染色体上是呈线性排列，从而得出了染色体是***载体的结论。1909年丹麦遗传学家约翰逊（W. Johansen，1859～1927）在《精密遗传学原理》一书中正式提出“***”概念。