五种生化***盒的研究意义
多酚氧化酶(PPO)(EC1.10.3.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,属于一种氧化酶,通常在铜离子存在下,能使一元酚和二元酚氧化产生醌,从而引起褐化,与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。
钾离子对于维持机体的正常渗透压及酸碱平衡有非常重要的作用,参与糖及蛋白代谢,保证***肌肉的正常功能。血1清钾高于5.5 mmol/L时称高血钾,高血钾可使***、肌肉应激性升高,使心肌应激性降低,导致心动过缓,血1清钾超过10 mmol/L时,可发生心室纤颤,甚至心脏在舒张期停跳。血1清钾低于3.5 mmol/L时称低血钾,低血钾可引起肌无力甚至肌肉弛缓性麻1痹,引起心肌应激性升高,出现心动过速、心律紊乱甚至在收缩期停跳。因此,血1清钾是常用生化测定指标。
脂肪代谢是机体内非常重要的代谢途径之一,其在细胞内的存储和利用对于维持细胞正常的能量代谢非常关键,且在细胞内环境稳态的维持上发挥着不可忽视的作用。越来越多的研究显示脂肪代谢与core的发展有着一定的关系;细胞异常增殖是所有bad core细胞的一个常见特性,在细胞异常增殖的过程中细胞膜和信号分子的形成需要更多的脂肪代谢中脂肪酸代谢和脂滴代谢的参与。
转移RNA
转移RNA(tRNA)在蛋白质合成过程中负责转运氨基酸、解读mRNA遗传密码。tRNA占细胞总RNA的10%~15%,绝大多数位于细胞质中。tRNA由Crick于1955年提出其存在,Zamecnik和 Hoagland于1957年鉴定。
tRNA一级结构具有以下特点:
①是一类单链小分子RNA,长73~95nt(共有序列76nt),沉降系数4S。
②是含稀有碱基***多的RNA,含7-15个稀有碱基(占全部碱基的15%~20%),位于非配对区。
③5′末端碱基往往是鸟piao呤。
④3'端是CCA序列,其中的腺苷酸常称为A76,其3’—OH是氨基酸结合位点。
植物DNA的SDS提取法:1 取2-3g新鲜叶片,在液氮中研磨成粉状(防止溶化)后转入15ml离心管中。2 加入5ml于65℃预热的提取缓冲液,65℃水浴保温30min(摇动数次),使提取液与样品充分混合。3 加入2ml5mol/LKAc,剧烈振荡,冰浴保温20min以上。4 2700×g离心20min,将上清液倒入新的15ml离心管中,(若提取DNA用于Southern等实验,一般在转移上清时加滤膜,防止样品残渣混入,可保证DNA纯度)。5 加入4ml氯1仿/异戊1醇(24∶1),摇匀,平衡,2700×g离心15min。6 在另一新的15ml离心管中加入5ml预冷的异丙1醇,将上清液用移液枪转入此管,在-20℃冷却30min以上。7 2700×g离心10min,弃去上清液,用4ml70%乙醇洗涤,室温保持10min。2700×g离心3min,倒去上清液。8 重复步骤7,用4ml70%乙醇洗涤,室温保持10min。2700×g离心3min,倒去上清液。超净工作台内吹干(3h左右)。9 加1mlTE缓冲液中溶解,加10μlRNase(10mg/ml),在37℃恒温箱中温育20min。10 再加100μl3mol/LNaAc和2ml无水乙醇,2700×g离心3min,倒去上清液。超净工作台内吹干(3h左右)。11 将DNA沉淀溶于150μlTE中,置于超净工作台内(3h左右)。将TE溶液转入已灭菌的1 5mleppendorf管中,-20℃保存备用。
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