蛋白质纯化信赖推荐「友名生物」
作者:友名生物2022/1/9 3:03:32







 无细胞蛋白质合成系统(The cell-free protein synthesis system)是一种以外源mRNA或DNA为模板,在细胞抽提物的酶系中补充底物和能量来合成蛋白质的体外系统。与传统的体内重组表达系统相比,体外无细胞合成系统具有多种优点,如可表达对细胞***1害作用或含有非天然氨基酸(如D-氨基酸)的特殊蛋白质,能够直接以PCR产物作为模板同时平行合成多种蛋白质,开展高通量药1物筛选和蛋白质组学的研究。



胰蛋白酶系自牛、羊或猪胰中提取的一种蛋白水解酶。中国***标准规定按干燥品计算,每1mg 的效价不得少于2500单位。 由牛、羊、猪胰脏提取而得的一种肽链内切酶,只断裂赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键。白色或米***结晶性粉末。溶于水,不溶于乙醇、甘油、氯1仿和乙1醚。分子量24 000,pI 10.5,***适pH值7.8~8.5左右。pH值2~3是稳定的。pH值5以上易自溶失活。pH>9.0不可逆失活。Ca2+对酶活性有稳定作用;***离子、有机磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶***1剂对其活性有强烈***。临床用于消1炎,工业上用于皮革制造、生丝处理、食品加工等。



20世纪70年代以来,人们通过酶***染色法,利用胰蛋白酶对肥大细胞(MC)进行染色,发现MC能够被染色,说明MC中一定含有胰蛋白酶活性物质。1981年Schwartz等进一步纯化这种酶后发现,它是由MC释放的,其活性90%以上来自一种酶,故命名为类胰蛋白酶。Miller等在1989年克1隆了第yi种类胰蛋白酶cDNA,其后又有几种类胰蛋白酶被克1隆。类胰蛋白酶在cDNA和蛋白水平被分为三类:α、β、γ,其中β含量***高。每个类胰蛋白酶***均含有6个外显子和5个内含子,编码30个氨基酸的前导链和245个氨基酸的活性的部位。通过氨基酸序列推断,α-类胰蛋白酶和β-类胰蛋白酶有90%的同源性。其主要区别在于β-类胰蛋白酶的-3位和215位氨基酸分别为精氨酸和甘氨酸,而α-类胰蛋白酶则分别为谷氨酰胺和天冬氨酸,两者的结构区别决定了它们活性差异。



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