回收产物的检测
1.紫外分光光度计法检测DNA在OD260处有明显吸收峰,当OD260=1时,相当于大约50 ng/μL双链DNA、40 ng/μL单链DNA。OD260/OD280≈1.6~1.9时,说明DNA纯度较高。若洗脱时不用洗脱缓冲液,而是用去离子水,会使比值偏低,因为离子的存在会影响吸光度。但不表示纯度低。
2.SYBR法检测取回收产物1 μL,与1 μL SYBR染料混匀,于荧光透1视仪下观察是否有黄绿色荧光。
3.琼脂糖凝胶电泳法检测取回收产物5 μL,与10×Loading Buffer混匀,DNA Marker加5 μL,电泳后凝胶成像观察。5 μL DNA Marker相当于每个条带50 ng DNA,观察目的条带亮度大致为Marker的两倍,则大致估算其浓度约为20 ng/μL。
核酸检测是确诊新冠肺1炎的重要标准,而检测流程中的每一个环节都是精细活,容不得半点马虎,是与病毒的正面交锋,核酸检测是如何“识别”病毒的?
从样本核对、取样灭活、核酸提取、体系配制、上机扩增到***后结果分析,核酸检测过程复杂繁琐,为了保证结果准确性需要一套严密流程,每一批样本在实验室里至少需要4到6个小时的筛查,对于出现异常的样本耗时则更长,一般检测呈阳性的样本,会再次复核,一般都需要8到10个小时才能完成检测报告。
鼻咽拭子的采集
被采集人员需要 保持头部不动,采样人员去除鼻腔内壁的分泌物。然后采样人员一手轻扶被采集人员头部,一手将鼻咽拭子缓缓插入鼻腔至鼻咽部。在鼻咽部,拭子将停留数秒吸取分泌物,而后采样人员轻轻旋转取出拭子,将样本保存并送检。
咽拭子的采集
被采集人员先用 生理盐水漱口,采样人员将拭子放入无菌生理盐水中湿润。被采集人员头部微仰并保持不动,嘴张大,并发“啊”音,露出两侧咽扁桃体,采集人员将拭子越过舌根,在被采集者两侧咽扁桃体稍微用力来回擦拭至少3次,然后再在咽后壁上下擦拭至少3次。
需要注意的是,两种采集方法, 被采集人员均会稍感不适,所以在采样的过程中,被采集人员需稍稍克服一下不适感, 配合采样人员的工作。不可过度活动头部,以免拭子划伤粘膜。如被采集人员发生刺激性咳嗽,采集过程需稍作暂停。
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