动物细胞培养

高速冷冻离心机在所有的细胞离体培养中，困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。

⑴血1清：动物细胞离体培养常常需要血1清。相对常用的是小牛血1清。血1清提供生长必需因子，如激1素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里，血1清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。

⑵支持物：大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用玻璃，塑料等作为支持物。

⑶气体交换：二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节，不断维持所需要的气体条件。

营养条件

1．培养基细胞培养基包含细胞生长所需的各种营养物质，包括碳水化合物、氨基酸、无机盐、***等。针对不同细胞的营养需求，有多种合成培养基可供选择，如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。

2．其他添加成分在各种合成培养基提供基础营养物质之外，还需根据不同细胞和不同的培养目的添加其他成分，如血1清、因子等。

血1清提供的是细胞外基质、生长因子和转铁蛋白等重要物质，常用的是胎牛血1清。要根据不同的细胞和不同的研究目的决定添加血1清的比例。10%～20%的血1清能维持细胞较快的生长增殖速度，称为生长培养液；为维持细胞缓慢生长或不死，添加2%～5%的血1清即可，称为维持培养液。但血1清中也存在***于细胞生长和繁殖的物质，如补体、免1疫球蛋白和一些生长***因子；成分不明确，影响对结果的分析；不同动物、不同批次的血1清活性差别较大，影响培养效果的稳定性。

谷氨酰胺是细胞生长重要的氮源，在细胞生长代谢过程中起重要作用，但由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定容易降解，4℃下放置7天即可分解约50%，故谷氨酰胺需在使用前添加。

iPS研究方向

1．解析诱导体细胞重编程为IPS细胞的分子机制

2．研究 iPS细胞生物学特性和行为(如自我copy、增殖和分化等)调控的机制及IPS细胞体外定向诱导分化机制

3．提高iPS细胞制备效率

4．充分评价iPS细胞临床应用的安全性

5．建立有效、安全、实用制备人iPS细胞的方法，即在阐明体细胞重编程为iPS细胞机制的基础上建立无遗传修饰的IPS细胞制备策略与方法(如仅利用一些小分子物质即将人的细胞重编程为iPS细胞)

6．在前一项研究的基础上，探索一条简便制备“个体特异的”或“***特异的”治1疗型人iPS细胞的技术路线和方法

1674年安东尼·凡·列文虎克（Antony van Leeuwenhoek，1632～1723）凭借自己制作的一种能放大物体影像200倍的镜片，观察到了血液中的红细胞。又于1677年，地在显微镜下看到了的存在。

1809年，法国博物学家（博物学即二十世纪后期所称的生物学、生命科学等的总称）拉马克（Jean-Baptiste de Lamarck，1744～1829）提出：“所有生物体都由细胞所组成，细胞里面都含有些会流动的‘液体’。”却没有具体的观察证据支持这个说法。

1824年，法国植物学家杜托息（Henri Dutrochet，1776～1847）在中提出“细胞确实是生物体的基本构造”又因为植物细胞比动物细胞多了细胞壁，因此观察技术还不成熟的时候比动物细胞更容易观察，也因此这个说法先被植物学者接受。