腺病毒是如何构成的

病毒滴度滴定（***培养半数感1染量TCID 50）：将分装好的病毒液接种一长满单层Hep-2细胞的96孔板，第yi列每孔加25μl病毒液，作1/lO 稀释，此后依次作倍比稀释，每稀释度接种8孔，***后一列做阴性对照.对照孔和感1染病毒孔均加入100μl维持液，置37℃ 、5%CO2 培养箱中培养。每天观察并记录出现CPE的孔数及具体时间，待细胞病变不再发展后，观察记录结果，用Reed-Muench法计算病毒滴度TCID 50。

腺病毒呈无囊膜的球形结构,其病毒粒子在感1染的细胞核内常呈晶格状排列,每个病毒颗粒包含一个36 kb的线性双链DNA,两端各有一个100~600 bp的反向末端重复序列(inverted terminal re-pea,t ITR), ITR的内侧为病毒包装信号,是病毒包装所需要的顺式作用元件。***组包含早期表达的与腺病毒copy相关的E1~E4***和晚期表达的与腺病毒颗粒组装相关的L1~L5***。

线状双股DNA与核心蛋白形成直径为60~65 nm的髓芯,被包裹于衣壳内。衣壳呈二十面体对称,由252个直径8~10 nm的壳粒组成,壳粒排列在三角形的面上,每边6个,其中240个为六邻体(非顶点壳粒) ,另12个为五邻体基底(顶点壳粒)。每个六邻体是六邻体蛋白的同源三聚体,三聚体的六邻体分子有一个三角形的塔尖和五面体的基底,塔区由4个环构成即loop1、loop2、loop3、loop4,基底包含两个区域P1、P2区[3]。六邻体上的表位(epitope)是诊断不同血1清型的标准,它包括哺乳动物腺病毒属的抗原成分,是病毒体对免1疫选择压力***敏感的部位。

每个五邻体基底上结合着1根(哺乳动物腺病毒)或2根(禽腺病毒)长9~77. 5 nm的纤维突起,这些纤维以五邻体蛋白为基底由衣壳面伸出,纤维顶端形成头节区,纤突有血1清特异性,且含有负责体外血细胞凝集的种属特异性抗原决***点。

腺病毒的分类

分类及自上个世纪50年***现并成功分离腺病毒以来，已陆续发现了100余个血1清型，其中人腺病毒有52种，分为A、B、C、D、E和F六个亚群（subgroup）。***cure常用的人的2型及5型腺病毒在血1清学分类上均属C亚群，在DNA序列上有95%的同源性。二者的增殖能力非常强，滴度通常可以达到109pfu (plaque forming unit)/ml，其在单个细胞中的***组拷贝数可达104（约占细胞总DNA的10%）。病毒颗粒比较稳定，通过CsCl梯度离心可以达到1010~1011pfu/ml，满足动物实验的要求。

腺病毒传播特点

宿主范围广对人致病性低，腺病毒载体系统可广泛用于人类及非人类蛋白的表达。腺病毒可感1染一系列哺乳动物细胞，因此在大多哺乳动物细胞和***中均可用来表达重组蛋白。特别需要指出的是：腺病毒具有嗜上皮细胞性，而人类的大多数的肿1瘤就是上皮细胞来源的。另外，腺病毒的copy***和致病***均已相当清楚，在人群中早已流行（70-80%成***内都有腺病毒的中和抗1体存在）。人类感1野1生型腺病毒后仅产生轻微的自限性症状，且病毒唑cure有效。