小分子类物质包含多肽、天然小分子、化学合成小分子等一系列的物质,被广泛用于medicine等各个领域。以往小分子的定量检测主要通过气相和液相色谱完成,存在周期长,检测仪器价格昂贵等多方面的不足。那么immune检测技术可以用于定量检测小分子吗?
免1疫检测***盒的技术基础就是抗原和抗1体的特异性结合,小分子特异性抗1体的制备即是小分子immune检测***盒制备的关键之处。小分子由于分子量小,结构简单,在免1疫学上划归为半抗原(Hapten),即只有immune反应性而没有immune原性的一类物质,不能直接刺激机体产生antibody但是却拥有和antibody结合的特性。随着抗1体制备技术的发展,小分子特异性抗1体的制备技术显得更为多元化
甘油三酯(TG)检测***盒(比色法),#KTB2200:用异丙1醇抽提取TG,KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸,Periodic acid氧化甘油生成甲醛,在氯离子存在下甲醛与Acetylacetone缩合生成***物质,在420 nm有特征吸收峰,其颜色的深浅与TG含量成正比。该***盒提供了一种简单的检测方法检测动物***、细胞、serum(浆)以及植物样本中甘油三酯(TG)的含量水平;而且细致优化了样本处理方法、实验操作流程以及结果计算过程。
游离胆固醇(FC)检测***盒(比色法),#KTB2210:胆固醇氧化酶催化游离胆固醇(FC)生成△4-胆甾烯酮和H2O2,过氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成红色醌类化合物,在500 nm有吸收峰,其颜色深浅与FC含量成正比。该***盒提供了一种简单的检测方法检测生物样本如动物***、细胞(***)、serum(浆)中游离胆固醇(FC)的含量水平;而且细致优化了样本处理方法、实验操作流程以及结果计算过程。
tRNA二级结构
约50%碱基配对,形成四段双螺旋,与五段非配对序列形成三叶草形结构。
该结构中存在四臂四环:
①氨基酸臂。
②二氢尿***H4N2臂(DHU臂、D臂)和二氢尿***H4N2环(DHU环、D环),特征是含二氢尿***H4N2(DHU、D)。
③反密码子臂和反密码子环,特征是反密码子环含反密码子。反密码子5′端与尿苷酸连接,3′端与piao呤核苷酸连接。TΨC臂(T臂)和TΨC环(Ψ环),特征是TΨC环含胸腺***H4N2核糖核苷酸T54假尿苷酸Ψ55胞苷酸C56。
④额外环3~21nt。
tRNA三级结构呈L形,氨基酸结合位点位于其一端,反密码子环位于其另一端,DHU环和TΨC环虽然在二级结构中位于两侧,但在三级结构中却相邻。尽管各种tRNA的长度和序列不尽相同,但其三级结构相似,提示三级结构与其功能密切相关。
PCR产物的回收(胶回收***盒)
1.胶回收的目的(1)去除非特异性扩增的产物(2)去除多余的底物(3)去除多余的Taq酶(4)得到目的片段
2.胶回收的过程(1)切胶:紫外下切胶,称重。之后用枪头将胶块捣碎。切胶的刀片建议选用一次性刀片,实验台等也尽可能用乙醇擦拭干净。可通过空EP管与装胶EP管质量的差值计算胶的质量。注意切胶时尽可能避免切到条带外的凝胶,且避免紫外时间过长。别忘记胶条有厚度,前后多余的部分也尽量切除。(2)溶胶:每1 mg胶加入1 μL膜结合液(MB),按比例1:1加入MB,55℃水浴溶解。每1~2 min震荡混匀,待溶解后至少在水浴中保持1~2 min,保证胶块完全溶解。在电泳过程中,DNA会与大分子的多糖紧密结合,凝胶的种类和质量不同,DNA与之结合力也不同,只有凝胶充分溶解DNA才能充分释放。否则,凝胶将与DNA一起沉淀下来,洗脱后将影响回收结果的纯度。(3)结合:将溶胶转移至纯化柱内,12000 rpm离心1 min,倒掉收集管中的废液,将纯化柱重新插回收集管中。胶块完全溶解后建议将胶液温度降至室温再上柱,因为纯化柱在温度较高时结合DNA的能力较弱。
版权所有©2025 产品网