无细胞系统是利用细胞提取物（而不是细胞）进行***转录和翻译的系统。一个无细胞***表达系统主要包括三个部分：细胞提取物，反应混合液，以及核酸模板

1.细胞提取物：从细胞中提取的物质，主要包含核糖体、RNA聚合酶、其他转录和翻译蛋白（比如σ因子、起始因子和延伸因子），以及用于能量代谢的酶和辅因子。在有些菌株的提取物中，可能***了蛋白酶和核酸酶的活性。

2.反应混合液：包含蛋白质合成所需的一些原料，如氨基酸、核苷酸、盐离子（如铵盐、镁、钾）、能源（糖类、磷酸肌酸等）、拥挤***（crowding agents）、代谢辅因子（辅酶A、NAD）、缓冲液、tRNA以及其他代谢添加剂等。

3.核酸模板：可以是质粒DNA或PCR产物线装DNA，浓度通常在1-20 nM。

无细胞系统一般的反应体积为10微升，但是根据其实际应用，反应体系可以从10^(-15)到10^3变化。在开始反应时，将三种组分在16-37℃下孵育，蛋白质合成将在1-24h内进行。

工业应用领域

① 皮革脱毛：酶脱毛（50-55℃， PH7.0-8.0，20—25u/ml）→ 水洗 → 浸酸 →鞣制。

② 胶片回收银：50℃， PH9.5-10.5，用20—23u/ml进行回收。

③丝绸脱胶：预处理 → 脱水 → 酸处理（蛋白酶18—24u/ml，肥皂0.75%， 48—50℃，30—60分钟，PH7—8）→ 脱水 → 扯皮 → 冲洗 → 脱水 → 抖松 → 烘干 → 抖松。

④ 饲料加工的应用：该酶与α—淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、糖化酶等复合使用。可广泛应用于仔猪、育成猪、禽类、鱼类的饲喂，可将酶制剂加入饲料后，人为的控制温度、湿度、PH和作用时间，使物料在酶的作用下得到一定程度的降解。小规模饲养时可将酶制剂直接添加到饲料中，经充分拌和后饲喂畜禽，拌和时应采用逐步扩大的拌和方法，以保证酶在饲料中的均匀分布。通常用量为饲料的0.1—1.0%。

蛋白质是由氨基酸以“脱水缩合”的方式组成的多肽链经过盘曲折叠形成的具有一定空间结构的物质。蛋白质中一定含有碳、氢、氧、氮元素，也可能含有硫、磷等元素。蛋白质是由α-氨基酸按一定顺序结合形成一条多肽链，再由一条或一条以上的多肽链按照其特定方式结合而成的高分子化合物。蛋白质就是构***体***的支架和主要物质，在***生命活动中，起着重要作用，可以说没有蛋白质就没有生命活动的存在。

原子数由m个氨基酸，n条肽链组成的蛋白质分子，至少含有n个—COOH，至少含有n个—NH2，肽键m-n个，O原子m+n个。分子质量设氨基酸的平均相对分子质量为a，含b个二硫键，蛋白质的相对分子质量=ma-18(m-n)-2b***控制***中的核苷酸 6信使RNA中的核苷酸 3蛋白质中氨基酸 1。蛋白质是由C（碳）、H（氢）、O（氧）、N（氮）组成，一般蛋白质可能还会含有P（磷）、S（硫）、Fe（铁）、Zn（锌）、Cu（铜）、B（硼）、Mn（锰）、I（碘）、Mo（钼）等。这些元素在蛋白质中的组成百分比约为：碳50% 氢7% 氧23% 氮16% 硫0~3% 其他微量。

（1）一切蛋白质都含氮元素，且各种蛋白质的含氮量很接近，均为16%；

（2）蛋白质系数：任何生物样品中每1g元氮的存在，就表示大约有100/16=6.25g蛋白质的存在， 6.25常称为蛋白质常数。