ELISA定性测定
定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或antibody作出'有'或'无'的简单回答,分别用'阳性'、'阴性'表示。'阳性'表示该标本在该测定系统中有反应。'阴性'则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果,即用滴度来表示反应的强度,其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中,将标本作一系列稀释后进行试验,呈阳性反应的***高稀释度即为滴度。根据滴度的高低,可以判断标本反应性的强弱,这比观察不稀释标本呈色的深浅判断为强阳性、弱阳性更具定量意义。
在间接法和夹心法ELISA中,阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA中则相反,阴性孔呈色深于阳性孔。
基于***工程技术制备小分子特异性antibody
通过大量的实验发现,小分子的偶联物并不是不能产生特异性针对小分子的抗1体,而是效价过低,不满足制备多克1隆抗1体和单克1隆抗1体的需要,但是***工程手段为制备该类型小分子特异性antibody提供了新的思路。该技术的核心在于制备antibody的***文库,通过噬菌体展示技术、核糖体展示技术等获取antibody的目的***,再利用蛋白表达系统制备重组antibody或者改造antibody,以获取针对小分子的特异性antibody。目前随着antibody***测序信息的公布和完善,为人工设计antibody提供了基础,这也会以后小分子特异性antibody的制备提供了新的途径。
信使RNA(mRNA)早先发现于1960年,在蛋白质合成过程中负责传递遗传信息、直接指导蛋白质合成,具有以下特点。
1.含量低,占细胞总RNA的1%~5%。
2.种类多,可达105种。不同***表达不同的mRNA。
3.寿命短,不同mRNA指导合成不同的蛋白质,完成使命后即被降解。***mRNA的平均半衰期约为1.5分钟。脊椎动物mRNA的半衰期差异极大,平均约为3小时。
4.长度差异大哺乳动物mRNA长度为5×102~1×105nt原核生物与真核生物的mRNA虽然在结构上有差异,但功能一样,都是指导蛋白质合成的模板。
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